who_实验室生物安全手册(中文版)第三版

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iii目录序……………………………………………………………………………………………………ⅷ致谢…………………………………………………………………………………………………ⅸ第1章总则……………………………………………………………………………………1引言………………………………………………………………………………………………1第一部分生物安全指南第2章微生物危险度评估…………………………………………………………………………7信息有限的标本…………………………………………………………………………………7危险度评估与遗传修饰微生物…………………………………………………………………8第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平………………………………………………310 9操作规范…………………………………………………………………………………………9实验室的设计和设施…………………………………………………………………………11实验室设备……………………………………………………………………………………13健康和医学监测…………………………………………………………………………15培训……………………………………………………………………………………………15废弃物处理……………………………………………………………………………………16化学品、火、电、辐射以及仪器设备安全………………………………………………………17第4章防护实验室——三级生物安全水平……………………………………………………18操作规范310 ………………………………………………………………………………………18实验室的设计和设施…………………………………………………………………………18实验室设备……………………………………………………………………………………19健康和医学监测…………………………………………………………………………19第5章最高防护实验室——四级生物安全水平………………………………………………22操作规范………………………………………………………………………………………22实验室的设计和设施…………………………………………………………………………22第6章实验动物设施……………………………………………………………………………25动物设施——一级生物安全水平……………………………………………………………26动物设施——二级生物安全水平……………………………………………………………310 26动物设施——三级生物安全水平……………………………………………………………27动物设施——四级生物安全水平……………………………………………………………27无脊椎动物……………………………………………………………………………………28实验室生物安全手册iv第7章实验室∕动物设施试运行指南…………………………………………………………29第8章实验室∕动物设施认证指南……………………………………………………………31第二部分实验室生物安全保障第9章实验室生物安全保障的概念……………………………………………………………41第三部分实验室设备第10章生物安全柜………………………………………………………………………………45Ⅰ级生物安全柜………………………………………………………………………………310 46Ⅱ级生物安全柜………………………………………………………………………………46Ⅲ级生物安全柜………………………………………………………………………………49生物安全柜的通风连接………………………………………………………………………49生物安全柜的选择…………………………………………………………………49实验室中生物安全柜的使用…………………………………………………………………50第11章安全设备…………………………………………………………………………………53负压柔性薄膜隔离装置………………………………………………………………………54移液辅助器310 ……………………………………………………………………………………54匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器…………………………………………………………55一次性接种环…………………………………………………………………………………55微型加热器……………………………………………………………………………………55个体防护装备和防护服………………………………………………………………………55第四部分微生物学操作技术规范第12章实验室技术………………………………………………………………………………61实验室中标本的安全操作……………………………………………………………………61移液管和移液辅助器的使用…………………………………………………………………61避免感染性物质的扩散310 ………………………………………………………………………62生物安全柜的使用……………………………………………………………………………62避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触…………………………………………62避免感染性物质的注入………………………………………………………………………63血清的分离……………………………………………………………………………………63离心机的使用…………………………………………………………………………………63匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器的使用…………………………………………………64组织研磨器的使用……………………………………………………………………………64冰箱与冰柜的维护和使用310 ……………………………………………………………………64装有冻干感染性物质安瓿的开启……………………………………………………………64装有感染性物质安瓿的储存…………………………………………………………………65目录v对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法…………………………………………65对可能含有朊蛋白物质的防护………………………………………………………………66第13章意外事故应对方案和应急程序…………………………………………………………68意外事故应对方案……………………………………………………………………………68微生物实验室应急程序………………………………………………………………………68第14章消毒和灭菌………………………………………………………………………………310 71定义……………………………………………………………………………………………71实验室材料的清洁……………………………………………………………………………71化学杀菌剂……………………………………………………………………………………72清除局部环境的污染…………………………………………………………………………75清除生物安全柜的污染………………………………………………………………………76洗手／清除手部污染…………………………………………………………………………76热力消毒和灭菌………………………………………………………………………………310 76焚烧……………………………………………………………………………………………78废弃物处理……………………………………………………………………………………78第15章感染性物质的运输………………………………………………………………………79国际运输规定…………………………………………………………………………………79基本的三层包装系统…………………………………………………………………………79溢出清除程序…………………………………………………………………………………81第五部分生物技术介绍第16章生物安全和重组DNA技术………………………………………………………………85生物表达系统的生物安全考虑………………………………………………………………85表达载体的生物安全考虑……………………………………………………………………310 85用于基因转移的病毒载体……………………………………………………………………85转基因动物和“基因敲除”动物………………………………………………………………86转基因植物……………………………………………………………………………………86遗传修饰生物体的危险度评估………………………………………………………………86进一步的考虑…………………………………………………………………………………87第六部分化学品、火和电的安全第17章危害性化学品……………………………………………………………………………91暴露途径………………………………………………………………………………………91化学品的储存310 …………………………………………………………………………………91关于不相容化学品的一般原则………………………………………………………………91化学品的毒性作用……………………………………………………………………………91爆炸性化学品…………………………………………………………………………………92化学品溢出……………………………………………………………………………………92实验室生物安全手册vi压缩气体和液化气……………………………………………………………………………92第18章其他实验室危害…………………………………………………………………………94火的危害310 ………………………………………………………………………………………94电的危害………………………………………………………………………………………95噪声……………………………………………………………………………………………95电离辐射………………………………………………………………………………………95第七部分安全组织和培训第19章生物安全官员和安全委员会…………………………………………………………101生物安全官员…………………………………………………………………………………101生物安全委员会………………………………………………………………………………101第20章后勤保障人员的安全…………………………………………………………………103工程和建筑物的维护保养……………………………………………………………………103清洁（内务）保养310 ………………………………………………………………………………103第21章培训规划………………………………………………………………………………104第八部分安全清单第22章安全清单………………………………………………………………………………109实验室建筑……………………………………………………………………………………109储存设施………………………………………………………………………………………109环境卫生和工作人员设施……………………………………………………………………109暖气和通风……………………………………………………………………………………110照明……………………………………………………………………………………………310 110保养……………………………………………………………………………………………110实验室生物安全保障…………………………………………………………………………110防火与消防……………………………………………………………………………………111易燃液体的储存………………………………………………………………………………111压缩气体和液化气……………………………………………………………………………111电的危害………………………………………………………………………………………112个体防护………………………………………………………………………………………310 112工作人员的健康与安全………………………………………………………………………112实验室仪器设备………………………………………………………………………………113感染性物质……………………………………………………………………………………113化学品和放射性物质…………………………………………………………………………114第九部分参考文献、附录和索引参考文献……………………………………………………………………………………………117目录vii附录1急救………………………………………………………………………………………121附录2工作人员的免疫接种……………………………………………………………………122附录3WHO生物安全合作中心………………………………………………………………123附录4设备的安全性310 ……………………………………………………………………………124可能产生危害的仪器设备……………………………………………………………………124附录5化学品：危害与预防………………………………………………………………………127索引…………………………………………………………………………………………………150viii序世界卫生组织（WHO）早就认识到安全，特别是生物安全，是一个重要的国际性问题，因此早在1983年就出版了《实验室生物安全手册》（LaboratoryBiosafetyManual）第1版。该手册鼓励各国接受和执行生物安全的基本概念，并鼓励针对本国实验室如何安全处理致病微生物制订操作规范。1983年以来，已经有许多国家利用该手册所提供的专家指导，制订了生物安全操作规范。该手册的第2版于1993年出版。在该手册第3版中，WHO310 将继续发挥她在国际生物安全领域的领导作用，阐述新千年所面临的生物安全和生物安全保障问题。该手册第3版自始至终强调了工作人员个人责任心的重要作用，并在下列几个方面增加了新的内容：危险度评估、重组DNA技术的安全利用以及感染性物质运输。世界上最近发生的事件表明，由于蓄意滥用和排放微生物因子和毒素，公共卫生正受到新的威胁。因此，第3版也介绍了生物安全保障的概念——保护微生物资源免受盗窃、遗失或转移，以免因微生物资源的不适当使用而危及公共卫生。第3版中还包括了1997年WHO出版的《卫生保健实验室安全》[1]（SafetyinHealth-CareLaboratories）中有关安全的内容。WHO《实验室生物安全手册》第3版对各个国家都是有益的参考和指南，它可以帮助制订并建立微生物学操作规范，确保微生物资源的安全，进而确保其可用于临床、研究和流行病学等各项工作。DrA.Asamoa-Baah助理总干事传染病事务世界卫生组织瑞士，日内瓦ix310 致谢《实验室生物安全手册》第3版的完成得益于下列人员的贡献，在此表示衷心的感谢：DrW.EmmettBarkley,HowardHughesMedicalInstitute,ChevyChase,MD,USADrMurrayL.Cohen,CentersforDiseaseControlandPrevention,Atlanta,GA,USA（retired）DrIngegerdKallings,SwedishInstituteofInfectiousDiseaseControl,Stockholm,SwedenMsMaryEllenKennedy,ConsultantinBiosafety,Ashton,Ontario,CanadaMsMargeryKennett,VictorianInfectiousDiseasesReferenceLaboratory,NorthMelbourne,Australia（retired）DrRichardKnudsen,OfficeofHealthandSafety,CentersforDiseaseControlandPrevention,Atlanta,GA,USADrNicolettaPrevisani,Biosafetyprogramme,WorldHealthOrganization,Geneva,SwitzerlandDrJonathanRichmond,OfficeofHealthandSafety,310 CentersforDiseaseControlandPrevention,Atlanta,GA,USA（retired）DrSyedA.Sattar,FacultyofMedicine,UniversityofOttawa,Ottawa,Ontario,CanadaDrDeborahE.Wilson,DivisionofOccupationalHealthandSafety,OfficeofResearchServices,NationalInstitutesofHealth,DepartmentofHealthandHumanServices,Washington,DC,USADrRiccardoWittek,InstituteofAnimalBiology,UniversityofLausanne,Lausanne,Switzerland并感谢下列人员所给予的协助：MsMaureenBest,OfficeofLaboratorySecurity,HealthCanada,Ottawa,CanadaDrMikeCatton,VictorianInfectiousDiseasesReferenceLaboratory,Melbourne,AustraliaDrShannaNesby,OfficeofHealthandSafety,CentersforDiseaseControlandPrevention,Atlanta,GA,USADrStefanWagener,CanadianScienceCentreforHumanandAnimalHealth,310 Winnipeg,Canada作者和审阅人还要感谢许多专业人员在《实验室生物安全手册》第1版和第2版以及1997年WHO出版的《卫生保健实验室安全》[1]中所做出的原创性贡献。1第1章总则引言在本手册中，我们根据感染性微生物的相对危害程度制订了危险度等级的划分标准（WHO的危险度1级、2级、3级和4级）。该危险度等级的划分仅适用于实验室工作。表1叙述了不同的危险度等级。表1310 感染性微生物的危险度等级分类危险度1级（无或极低的个体和群体危险）不太可能引起人或动物致病的微生物。危险度2级（个体危险中等，群体危险低）病原体能够对人或动物致病，但对实验室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。危险度3级（个体危险高，群体危险低）病原体通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感染有有效的预防和治疗措施。危险度4级（个体和群体的危险均高）病原体通常能引起人或动物的严重疾病，并且很容易发生个体之间的直接或间接传播，对感染一般没有有效的预防和治疗措施。实验室可以分为基础实验室——一级生物安全水平、基础实验室——二级生物安全水平、防护实验室——三级生物安全水平和最高防护实验室——四级生物安全水平。根据操作不同危险度等级微生物所需的实验室设计特点、建筑构造、防护设施、仪器、操作以及操作程序来决定实验室的生物安全水平。表2叙述了与不同危险度等级相对应的（而非“等同的”）各危险度等级微生物所要求的实验室生物安全水平。实验室生物安全手册2表2310 与微生物危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设备危险度等级生物安全水平实验室类型实验室操作安全设施1级基础实验室——一级生物安全水平基础的教学、研究GMT不需要；开放实验台2级基础实验室——二级生物安全水平初级卫生服务；诊断、研究GMT加防护服、生物危害标志开放实验台，此外需BSC用于防护可能生成的气溶胶3级防护实验室——三级生物安全水平特殊的诊断、研究在二级生物安全防护水平上增加特殊防护服、进入制度、定向气流BSC和／或其他所有实验室工作所需要的基本设备4级最高防护实验室——四级生物安全水平危险病原体研究在三级生物安全防护水平上增加气锁入口、出口淋浴、污染物品的特殊处理Ⅲ级BSC或Ⅱ级BSC并穿着正压服、双开门高压灭菌器（穿过墙体）、经过滤的空气BSC：生物安全柜；GMT310 ：微生物学操作技术规范（见本手册第4部分）。每个国家（地区）应该按照危险度等级，并考虑以下因素来制订各自的微生物分类目录：1、微生物的致病性。2、微生物的传播方式和宿主范围。它们可能会受到当地人群已有的免疫水平、宿主群体的密度和流动、适宜媒介的存在以及环境卫生水平等因素的影响。3、当地所具备的有效预防措施。这些措施包括：通过接种疫苗或给予抗血清的预防（被动免疫）；卫生措施，例如食品和饮水的卫生；动物宿主或节肢动物媒介的控制。310 4、当地所具备的有效治疗措施。这些措施包括：被动免疫、暴露后接种疫苗以及使用抗生素、抗病毒药物和化学治疗药物，还应考虑出现耐药菌株的可能性。在实验室工作中，应根据危险度评估结果将微生物因子归入某一生物安全水平。在通过危险度评估工作来确立适当的生物安全水平时，要考虑危险度等级以及其他一些因素。例如，归入危险度2级的微生物因子，进行安全工作通常需要二级生物安全水平的设施、仪器、操作和规程。但是，如果特定实验需要发生高浓度的气溶胶时，由于三级生物安全水平通过对实验工作场所内气溶胶实施更高级别的防护，所以更适于提供所必需的生物安全防护。因此，在确定所从事特定工作的生物安全水平时，应根据危险度评估结果来进行专业判断，而不应单纯根据所使用病原微生物所属的某一危险度等级来机械地确定所需的实验室生物安全水平（见第2章）。表3汇总了四种不同生物安全水平的防护要求。第1章基本原则3表3不同生物安全水平对设施的要求生物安全水平一级二级三级四级实验室隔离a不需要不需要需要需要房间能够密闭消毒不需要不需要需要需要通风——向内的气流不需要最好有需要需要——通过建筑系统的通风设备不需要最好有需要需要——HEPA过滤排风不需要不需要需要/不需要b需要双门入口不需要不需要需要需要气锁不需要不需要不需要需要带淋浴设施的气锁不需要不需要不需要需要通过间不需要不需要需要－带淋浴设施的通过间不需要不需要需要/不需要c不需要污水处理不需要不需要需要/不需要c需要310 高压灭菌器——现场不需要最好有需要需要——实验室内不需要不需要最好有需要——双门不需要不需要最好有需要生物安全柜不需要最好有需要需要人员安全监控条件d不需要不需要最好有需要a在环境与功能上与普通流动环境隔离b取决于排风位置（见第4章）c取决于实验室中所使用的微生物因子d例如：观察窗、闭路电视、双向通讯设备因此，在选定生物安全水平时，要考虑所使用的生物体（病原因子）、可利用的实验设施、实验室内从事安全工作所需要的仪器的操作和程序。5310 第一部分生物安全指南67第2章微生物危险度评估310 生物安全工作的核心是危险度评估。可以借助许多方法来对某一个特定的操作程序或实验进行危险度评估，其中最重要的是专业判断。危险度评估应当由那些对所涉及的微生物特性、设备和规程、动物模型以及防护设备和设施最为熟悉的人员来进行。实验室主任或项目负责人应当负责确保进行充分和及时的危险度评估，同时也有责任与所在机构的安全委员会和生物安全工作人员密切合作，以确保有适当的设备和设施来进行相关的研究工作。危险度评估一旦进行，还应当考虑收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的新信息，以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和修订。进行微生物危险度评估最有用的工具之一就是列出微生物的危险度等级（见第1章）。然而对于一个特定的微生物来讲，在进行危险度评估时仅仅参考其危险度等级是远远不够的，适当时还应考虑其他一些因素，包括：1、微生物的致病性和感染数量2、暴露的潜在后果3、自然感染途径4、实验室操作所致的其他感染途径（非消化道途径、空气传播、食入）5、微生物在环境中的稳定性6、所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量7、适宜宿主（人或动物）的存在8、从动物研究和实验室感染报告或临床报告中得到的信息9、计划进行的实验室操作（如超声处理、气溶胶化、离心等）10、可能会扩大微生物的宿主范围或改变微生物对于已知有效治疗方案敏感性的所有基因技术（见第16章）11、当地是否能进行有效的预防或治疗干预。根据危险度评估过程中所明确的上述信息，可以确定所计划开展的研究工作的生物安全水平级别，选择合适的个体防护装备，并结合其他安全措施制订标准操作规范（standardoperatingprocedure，SOP），以确保在最安全的水平下来开展工作。310 信息有限的标本在获得足够的信息以后，就能很好地进行上述危险度评估工作。但是，也有在对相关信息了解较少时进行危险度评估的情况（如对于一些现场收集的临床标本或流行病学样品），这些情况下应当谨慎地采取一些较为保守的标本处理方法。1、只要标本取自病人，均应当遵循标准防护方法[2]，并采用隔离防护措施（如手套、防护服、眼睛保护）。2、基础防护——处理此类标本时最低需要二级生物安全水平。3、标本的运送应当遵循国家和／或国际的规章和规定。下列信息可能有助于确定处理这些标本的危险度：1、病人的医学资料实验室生物安全手册82、流行病学资料（发病率和死亡率资料、可疑的传播途径、其他有关暴发的调查资料）3、有关标本来源地的信息。在暴发病因不明的疾病时，可能应由国家主管部门和∕或WHO制订并在万维网上公布适当的专门指南［如2003年发生严重急性呼吸综合征（SevereAcuteRespiratorySyndrome，SARS）时的情况］，指导标本应如何运输以及在标本分析时应按何种生物安全水平执行。危险度评估与遗传修饰微生物关于危险度评估以及遗传修饰生物体（genetically310 modifiedorganisms，GMOs）的详细讨论见第16章。9第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平本手册旨在针对危险度１～４级微生物提出不同等级生物安全水平实验室所应具备的最低要求的指南和建议。虽然其中的一些建议对于某些危险度１级的生物体来说可能没有必要，但是这些建议对于训练工作人员掌握规范（安全）的微生物学操作技术（GMT）来说是必要的。310 诊断和卫生保健实验室（以公共卫生、临床或医院为基础的）必须设计成二级或二级以上生物安全水平。由于没有一个实验室能够完全地控制其所接收的标本，故实验室的操作人员可能会接触比预期更高危险度的微生物，因此，在制订生物安全计划和政策时要注意到这种可能性。在某些国家，临床实验室必须经过认可。全世界范围都应采纳并实行生物安全标准防护[2]。关于一级和二级生物安全水平的基础实验室的指南，本手册介绍得较为全面、详尽，因为这些指南对于各级生物安全实验室都是最基本的。后面介绍的（第４章和第5章）三级生物安全水平的防护实验室和四级生物安全水平的最高防护实验室所应遵循的指南，则是对上述指南的修改和补充，用于操作更危险的病原体。操作规范本规程中列出了最基本的实验室操作和程序，他们是微生物学操作技术规范的基础。在规划实验室和国家级实验室项目时，可以根据这些规程来制订实验室安全操作的书面程序。每个实验室都应该采用“安全手册”或“操作手册”，其中定义了已知的和潜在的危害，并规定了特殊的操作程序来避免或尽量减小这种危害。规范的微生物学操作技术是实验室安全的基础，而专门的实验设备仅仅是一种补充，绝不能替代正确的操作规范。下面列出了一些最重要的概念。进入规定1、在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物时，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志（图1）。2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。3、实验室的门应保持关闭。4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。5、进入动物房应当经过特别批准。6、与实验室工作无关的动物不得带入实验室。人员防护1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。实验室生物安全手册103、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。5、严禁穿着实验室防护服离开实验室，（如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间）。6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。7、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。9、在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。图1张贴于实验室门上的生物危害警告标志310 操作规范1、严禁用口吸移液管。2、严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。3、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。4、应限制使用皮下注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液，皮下注射针头和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室主管报告。实验室应保存这些事件或事故的书面报告。6、必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序，并予以遵守执行。第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平11310 7、污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果，可能需要准备污水处理系统。8、需要带出实验室的手写文件必须保证在实验室内没有受到污染。实验室工作区1、实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。2、发生具有潜在危害性的材料溢出以及在每天工作结束之后，都必须清除工作台面的污染。3、所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须清除污染。4、在进行包装和运输时必须遵循国家和∕或国际的相关规定。5、如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。生物安全管理1、实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。2、实验室主管（向实验室主任汇报）应当保证提供常规的实验室安全培训。3、要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，同时要求他们阅读生物安全或操作手册，并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。实验室内应备有可供取阅的安全或操作手册。4、应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。5、如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗，并应妥善保存相应的医学记录。实验室的设计和设施在设计实验室和安排某些类型的实验工作时，对于那些可能造成安全问题的情况要加以特别关注，这些情况包括：310 1、气溶胶的形成2、处理大容量和∕或高浓度微生物3、仪器设备过度拥挤和过多4、啮齿动物和节肢动物的侵扰5、未经允许人员进入实验室6、工作流程：一些特殊标本和试剂的使用。一级和二级生物安全水平实验室的设计实例分别见图2和图3。实验室生物安全手册12图2典型的一级生物安全水平实验室（图片由CUH2A，Princeton，NJ，USA310 提供）设计特征1、必须为实验室安全运行、清洁和维护提供足够的空间。2、实验室墙壁、天花板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当防滑。3、实验台面应是防水的，并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。4、应保证实验室内所有活动的照明，避免不必要的反光和闪光。5、实验室器具应当坚固耐用，在实验台、生物安全柜和其他设备之间及其下面要保证有足够的空间以便进行清洁。6、应当有足够的储存空间来摆放随时使用的物品，以免实验台和走廊内混乱。在实验室的工作区外还应当提供另外的可长期使用的储存间。7、应当为安全操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。8、在实验室的工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施。9、在实验室的工作区外应当有进食、饮水和休息的场所。10、每个实验室都应有洗手池，并最好安装在出口处，尽可能用自来水。第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平13310 11、实验室的门应有可视窗，并达到适当的防火等级，最好能自动关闭。12、二级生物安全水平时，应在靠近实验室的位置配备高压灭菌器或其他清除污染的工具。13、安全系统应当包括消防、应急供电、应急淋浴以及洗眼设施。14、应当配备具有适当装备并易于进入的急救区或急救室（见附录1）。15、在设计新的设施时，应当考虑设置机械通风系统，以使空气向内单向流动。如果没有机械通风系统，那么实验室窗户应当能够打开，同时应安装防虫纱窗。16、必须为实验室提供可靠和高质量的水。要保证实验室水源和饮用水源的供应管道之间没有交叉连接。应当安装防止逆流装置来保护公共饮水系统。17、要有可靠和充足的电力供应和应急照明，以保证人员安全离开实验室。备用发电机对于保证重要设备的正常运转（如培养箱、生物安全柜、冰柜等）以及动物笼具的通风都是必要的。18、要有可靠和充足的燃气供应。供气设施必须得到良好维护。19、实验室和动物房偶尔会成为某些人恶意破坏的目标。必须考虑物理和防火安全措施。必须使用坚固的门、纱窗以及门禁系统。适当时还应使用其他措施来加强安全保障（见第9章）。实验室设备处理生物安全危害时，使用安全设施并结合规范的操作将有助于降低危险。本节阐述了适用于所有生物安全实验室的相关设备的基本原则。有关高级别生物安全实验室设备的要求将在相关章节中阐述。实验室主任应咨询生物安全官员和安全委员会（如果有），确保配备足量的设备，并能正确使用。选择设备时应符合一些基本原则，即：310 1、在设计上应能阻止或限制操作人员与感染性物质间的接触2、建筑材料应防水、耐腐蚀并符合结构要求3、设备装配后应无毛刺、锐角以及易松动的部件4、设备的设计、建造与安装应便于操作、易于维护、清洁、清除污染和进行质量检验。应尽量避免使用玻璃及其他易碎的物品。需要详细咨询设备的性能和结构规格，以确保设施具备必要的安全特性（参见第10和第11章）。实验室生物安全手册14图3典型的二级生物安全水平实验室（图片由CUH2A，Princeton，NJ，USA提供）。在生物安全柜中进行可能发生气溶胶的操作程序。门保持关闭并贴上适当的危险标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。310 基本生物安全设备1、移液辅助器——避免用口吸的方式移液。有不同设计的多种产品可供使用。2、生物安全柜，在以下情况使用：——处理感染性物质；如果使用密封的安全离心杯，并在生物安全柜内装样、取样，则这类材料可在开放实验室离心——空气传播感染的危险增大时——进行极有可能产生气溶胶的操作时（包括离心、研磨、混匀、剧烈摇动、超声破碎、打开内部压力和周围环境压力不同的盛放有感染性物质的容器、动物鼻腔接种以及从动物或卵胚采集感染性组织）。3、一次性塑料接种环，也可在生物安全柜内使用电加热接种环，以减少生成气溶胶。4、螺口盖试管及瓶子。第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平15310 5、用于清除感染性材料污染的高压灭菌器或其他适当工具。6、一次性巴斯德塑料移液管，尽量避免使用玻璃制品。7、在投入使用前，像高压灭菌器和生物安全柜等设备必须用正确方法进行验收。应参照生产商的说明书定期检测（见第7章）。健康和医学监测主管机构有责任通过实验室主任来确保实验室全体工作人员接受适当的健康监测。监测的目的是监控职业获得性疾病。为达到这些目的，应进行如下工作：1、根据需要提供主动或被动免疫（见附录2）2、促进实验室感染的早期检测3、应禁止高度易感人群（如孕妇或免疫损伤人员）在高危险实验室中工作4、提供有效的个体防护装备和方法。在一级生物安全水平操作微生物的实验室工作人员的监测指南历史证据表明，在一级生物安全水平操作的微生物不太可能引起人类疾病或兽医学意义的动物疾病。但理想的做法是，所有实验室工作人员应进行上岗前的体检，并记录其病史。疾病和实验室意外事故应迅速报告，所有工作人员都应意识到应用规范的实验室操作技术的重要性。310 在二级生物安全水平操作微生物的实验室工作人员的监测指南1、必须有录用前或上岗前的体检。记录个人病史，并进行一次有目的的职业健康评估。2、实验室管理人员要保存工作人员的疾病和缺勤记录。3、育龄期妇女应知道某些微生物（如风疹病毒）的职业暴露对未出生孩子的危害。保护胎儿的正确措施因妇女可能接触的微生物而异。培训人为的失误和不规范的操作会极大地影响所采取的安全措施对实验室人员的防护效果。因此，熟悉如何识别与控制实验室危害的、有安全意识的工作人员，是预防实验室感染、差错和事故的关键。基于这一原因，不断地进行安全措施方面的在职培训是非常必要的。一个有效的安全规程首先始于实验室管理者，管理者应确保将安全的实验室操作及程序融合到工作人员的基本培训中。安全措施方面的培训是新工作人员岗前培训的有机组成部分，应向工作人员介绍生物安全操作规范和实验室操作指南，包括安全手册或操作手册。应采用诸如签名传阅的方法，来确保工作人员阅读并理解了这些规程。实验室主管在对属下工作人员进行规范性实验室操作技术培训时起关键作用，生物安全官员可以帮助进行人员培训并研制教具和教案（参见第21章）。人员培训的内容应始终包括如何采用安全的方法来进行下列所有实验室工作人员都会经常遇到的高危操作，包括：1、吸入危险（气溶胶产物），如使用接种环、划线接种琼脂平板、移液、制作涂片、打开培养物、采集血液／血清标本、离心等2、食入危险，如处理标本、涂片以及培养物3、在使用注射器和针头时刺伤皮肤的危险4、处理动物时被咬伤、抓伤5、处理血液以及其他有潜在病理学危害的材料6、感染性材料的清除污染和处理。实验室生物安全手册16废弃物处理废弃物是指将要丢弃的所有物品。在实验室内，废弃物最终的处理方式与其污染被清除的情况是紧密相关的。对于日常用品而言，很少有污染材料需要真正清除出实验室或销毁。大多数的玻璃器皿、仪器以及实验服都可以重复或再使用。废弃物处理的首要原则是所有感染性材料必须在实验室内清除污染、高压灭菌或焚烧。用以处理潜在感染性微生物或动物组织的所有的实验室物品，在被丢弃前应考虑的主要问题有：1、是否已采取规定程序对这些物品进行了有效的清除污染或消毒？2、如果没有，他们是否以规定的方式包裹，以便就地焚烧或运送到其他有焚烧设施的地方进行处理？3、丢弃已清除污染的物品时，是否会对直接参与丢弃的人员，或在设施外可能接触到丢弃物的人员造成任何潜在的生物学或其他方面的危害？清除污染高压蒸汽灭菌是清除污染时的首选方法。需要清除污染并丢弃的物品应装在容器中（如根据内容物是否需要进行高压灭菌和／或焚烧而采用不同颜色标记的可以高压灭菌的塑料袋）。也可采用其他可以除去和／或杀灭微生物的替代方法（详见第14章）。污染性材料和废弃物的处理和丢弃程序要对感染性物质及其包装物进行鉴别并分别进行处理，相关工作要遵守国家和国际规定。废弃物可以分成以下几类：1、可重复或再使用，或按普通“家庭”废弃物丢弃的非污染（非感染性）废弃物2、污染（感染性）锐器——皮下注射用针头、手术刀、刀子及破碎玻璃；这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容器内，并按感染性物质处理3、通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染材料4、高压灭菌后丢弃的污染材料5、直接焚烧的污染材料。锐器皮下注射针头用过后不应再重复使用，包括不能从注射器上取下、回套针头护套、截断等，应将其完整地置于盛放锐器的一次性容器中。单独使用或带针头使用的一次性注射器应放在盛放锐器的一次性容器内焚烧，如需要可先高压灭菌。盛放锐器的一次性容器必须是不易刺破的，而且不能将容器装得过满。当达到容量的四分之三时，应将其放入“感染性废弃物”的容器中进行焚烧，如果实验室规程需要，可以先进行高压灭菌处理。盛放锐器的一次性容器绝对不能丢弃于垃圾场。高压灭菌后重复使用的污染（有潜在感染性）材料任何高压灭菌后重复使用的污染（有潜在感染性）材料不应事先清洗，任何必要的清洗、修复必须在高压灭菌或消毒后进行。第3章基础实验室——一级和二级生物安全水平17310 废弃的污染（有潜在感染性）材料除了锐器按上面的方法进行处理以外，所有其他污染（有潜在感染性）材料在丢弃前应放置在防渗漏的容器（如有颜色标记的可高压灭菌塑料袋）中高压灭菌。高压灭菌后，物品可以放在运输容器中运送至焚烧炉。如果可能，即使在清除污染后，卫生保健单位的废弃物也不应丢弃到垃圾场。如果实验室中配有焚烧炉，则可以免去高压灭菌：污染材料应放在指定的容器（如有颜色标记的袋子）内直接运送到焚烧炉中。可重复使用的运输容器应是防渗漏的，有密闭的盖子。这些容器在送回实验室再次使用前，应进行消毒清洁。应在每个工作台上放置盛放废弃物的容器、盘子或广口瓶，最好是不易破碎的容器（如塑料制品）。当使用消毒剂时，应使废弃物充分接触消毒剂（即不能有气泡阻隔），并根据所使用消毒剂的不同（见第14章）保持适当接触时间。盛放废弃物的容器在重新使用前应高压灭菌并清洗。污染材料的焚烧必须得到公共卫生、环保部门以及实验室生物安全官员的批准（见第14章中“焚烧”部分）。化学品、火、电、辐射以及仪器设备安全化学品、火、电或辐射事故可以间接导致病原微生物屏障系统的破坏。因此，所有微生物实验室在这些方面必须坚持很高的安全标准。国家或地方的主管部门通常会制订相关的法规和条例，必要时可以从他们那里寻求帮助。在本手册的第六部分（第17和第18章）将更详细地讨论化学品、火、电及辐射的危害。有关安全设施的其他资料参见第11章。18第4章防护实验室——三级生物安全水平310 三级生物安全水平的防护实验室是为处理危险度3级微生物和大容量或高浓度的、具有高度气溶胶扩散危险的危险度2级微生物的工作而设计的。三级生物安全水平需要比一级和二级生物安全水平的基础实验室（见第３章）更严格的操作和安全程序。在本章中所列出的指标是在一级和二级生物安全水平的基础实验室的标准之上所需增添的部分，因此三级生物安全水平的防护实验室首先必须应用基础实验室的指标。主要的增添部分和修改为：1、操作规范2、实验室设计和设施3、健康和医学监测。三级生物安全实验室应在国家或其他有关的卫生主管部门登记或列入名单。操作规范除下列修改以外，应采用一级和二级生物安全水平的基础实验室的操作规范：1、张贴在实验室入口门上的国际生物危害警告标志（见图1）应注明生物安全级别以及管理实验室出入的负责人姓名，并说明进入该区域的所有特殊条件，如免疫接种状况。2、实验室防护服必须是正面不开口的或反背式的隔离衣、清洁服、连体服、带帽的隔离衣，必要时穿着鞋套或专用鞋。前系扣式的标准实验服不适用，因为不能完全罩住前臂。实验室防护服不能在实验室外穿着，且必须在清除污染后再清洗。当操作某些微生物因子时（如农业或动物感染性因子），可以允许脱下日常服装换上专用的实验服。3、开启各种潜在感染性物质的操作均必须在生物安全柜或其他基本防护设施（参见第10章）中进行。4、有些实验室操作，或在进行感染了某些病原体的动物操作时，必须配备呼吸防护装备（见第11章）。实验室的设计和设施除下列修改以外，应采用一级和二级生物安全水平的基础实验室的设计和设施：1、实验室应与同一建筑内自由活动区域分隔开，具体可将实验室置于走廊的盲端，或设隔离区和隔离门，或经缓冲间（即双门通过间或二级生物安全水平的基础实验室）进入。缓冲间是一个在实验室和邻近空间保持压差的专门区域，其中应设有分别放置洁净衣服和脏衣服的设施，而且也可能需要有淋浴设施。2、缓冲间的门可自动关闭且互锁，以确保某一时间只有一扇门是开着的。应当配备能击碎的面板供紧急撤离时使用。3、实验室的墙面、地面和天花板必须防水，并易于清洁。所有表面的开口（如管道通过处）第4章310 防护实验室——三级生物安全水平19必须密封以便于清除房间污染。4、为了便于清除污染，实验室应密封。需建造空气管道通风系统以进行气体消毒。5、窗户应关闭、密封、防碎。6、在每个出口附近安装不需用手控制的洗手池。7、必须建立可使空气定向流动的可控通风系统。应安装直观的监测系统，以便工作人员可以随时确保实验室内维持正确的定向气流，该监测系统可带也可不带警报系统。8、在构建通风系统时，应保证从三级生物安全实验室内所排出的空气不会逆流至该建筑物内的其他区域。空气经高效空气过滤器（high-efficiencyparticulateairfilters，HEPA过滤器）过滤、更新后，可在实验室内再循环使用。当实验室空气（来自生物安全柜的除外）排出到建筑物以外时，必须在远离该建筑及进气口的地方扩散。根据所操作的微生物因子不同，空气可以经HEPA过滤器过滤后排放。可以安装取暖、通风和空调（HVAC）控制系统来防止实验室出现持续正压。应考虑安装视听警报器，向工作人员发出HVAC系统故障信号。9、所有的HEPA过滤器必须安装成可以进行气体消毒和检测的方式。10、生物安全柜的安装位置应远离人员活动区，且避开门和通风系统的交叉区（见第10章）。11、从Ⅰ级和Ⅱ级生物安全柜（见第10章）排出的空气，在通过HEPA310 过滤器后排出时，必须避免干扰安全柜的空气平衡以及建筑物排风系统。12、防护实验室中应配置用于污染废弃物消毒的高压灭菌器。如果感染性废弃物需运出实验室处理，则必须根据国家或国际的相应规定，密封于不易破裂的、防渗漏的容器中。13、供水管必须安装防逆流装置。真空管道应采用装有液体消毒剂的防气阀和HEPA过滤器或相当产品进行保护。备用真空泵也应用防气阀和过滤器进行适当保护。14、三级生物安全水平的防护实验室，其设施设计和操作规范应予存档。三级生物安全水平实验室设计的实例见图4。实验室设备在三级生物安全水平实验室中选择设备［包括生物安全柜（见第10章）等］的原则，与二级生物安全水平的基础实验室一样。但在三级生物安全水平，所有和感染性物质有关的操作均需在生物安全柜或其他基本防护设施中进行。像离心机等需要另外配置防护用附件（如安全离心桶或防护转子）的仪器需要进行特别考虑。有些离心机或其他设备（如用于感染性细胞的分选仪器）可能需要在局部另外安装带有HEPA310 过滤器的排风系统以达到有效的防护效果。健康和医学监测一级和二级生物安全水平的基础实验室的健康和医学监测的目的也适用于三级生物安全水平的防护实验室，但需作如下修改：1、对在三级生物安全水平的防护实验室内工作的所有人员，要强制进行医学检查。内容包括一份详细的病史记录和针对具体职业的体检报告。2、临床检查合格后，给受检者配发一个医疗联系卡（如图5所示），说明他或她受雇于三级生物安全水平的防护实验室。卡片上应有持卡者的照片，卡片应制成钱包大小，并由持卡者随身携带。所填写的联系人姓名需经所在机构同意，应包括实验室主任、医学顾问和／或生物安全官员。实验室生物安全手册20图4典型的三级生物安全水平实验室（图片由CUH2A，Princeton，NJ，USA提供）。实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭菌以清除污染。应有非手控的水槽。形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜中进行。第4章防护实验室——三级生物安全水平21A、卡片正面B、卡片反面图5310 医疗联系卡的推荐样式22第5章最高防护实验室——四级生物安全水平四级生物安全水平的最高防护实验室是为进行与危险度4级微生物相关的工作而设计的。这种实验室在建设和投入使用前，应充分咨询有运作类似设施经验的机构。四级生物安全水平的最高防护实验室的运作应在国家或其他有关的卫生主管机构的管理下进行。下列资料仅作为介绍性材料，有关四级生物安全水平实验室发展的实质性工作，应与WHO的生物安全规划处1联系相关资料。310 操作规范除下列修改以外，应采用三级生物安全水平的操作规范：1、实行双人工作制，任何情况下严禁任何人单独在实验室内工作。这一点在防护服型四级生物安全水平实验室中工作时尤其重要。2、在进入实验室之前以及离开实验室时，要求更换全部衣服和鞋子。3、工作人员要接受人员受伤或疾病状态下紧急撤离程序的培训。4、在四级生物安全水平的最高防护实验室中的工作人员与实验室外面的支持人员之间，必须建立常规情况和紧急情况下的联系方法。实验室的设计和设施三级生物安全水平的防护实验室的要求也适用于四级生物安全水平的最高防护实验室，但需增加如下几点：1、基本防护。必须配备由下列之一或几种组合而成的、有效的基本防护系统。——Ⅲ级生物安全柜型实验室：在进入有Ⅲ级生物安全柜的房间（安全柜房间）前，要先通过至少有两道门的通道。在该类实验室结构中，由Ⅲ级生物安全柜来提供基本防护。实验室必须配备带有内外更衣间的个人淋浴室。对于不能从更衣室携带进出安全柜型实验室的材料、物品，应通过双门结构的高压灭菌器或熏蒸室送入。只有在外门安全锁闭后，实验室内的工作人员才可以打开内门取出物品。高压灭菌器或熏蒸室的门采用互锁结构，除非高压灭菌器运行了一个灭菌循环，或已清除熏蒸室的污染，否则外门不能打开（见第10章）。——防护服型实验室：自带呼吸设备的防护服型实验室，在设计和设施上与配备Ⅲ310 级生物安全柜的四级生物安全水平实验室有明显不同。防护服型实验室的房间布局设计成人员可以由更衣室和清洁区直接进入操作感染性物质的区域。必须配备清除防护服污染的淋浴室，以供人员离开实验室时使用。还需另外配备有内外更衣室的独立——————————1Biosafetyprogramme,DepartmentofCommunicableDiseaseSurveillanceandResponse,WorldHealthOrganization,23的个人淋浴室。进入实验室的人员需穿着一套正压的、供气经HEPA310 过滤的连身防护服。防护服的空气必须由双倍用气量的独立气源系统供给，以备紧急情况下使用。人员通过装有密封门的气锁室进入防护服型实验室。必须为在防护服型实验室内工作的人员安装适当的报警系统，以备发生机械系统或空气供给故障时使用（见第10章）。2、进入控制。四级生物安全水平的最高防护实验室必须位于独立的建筑内，或是在一个安全可靠的建筑中明确划分出的区域内。人员或物品的进出必须经过气锁室或通过系统。人员进入时，需更换全部衣服，而离开时，在穿上自己的日常服装前应淋浴。3、通风系统控制。设施内应保持负压。供风和排风均需经HEPA过滤。Ⅲ级安全柜型实验室和防护服型实验室的通风系统有显著差异：——Ⅲ级安全柜型实验室：通入Ⅲ级生物安全柜的气体可以来自室内，并经过安装在生物安全柜上的HEPA过滤器，或者由供风系统直接提供。从Ⅲ级生物安全柜内排出的气体在排到室外前需经两个HEPA过滤器过滤。工作中，安全柜内相对于周围环境应始终保持负压。应为安全柜型实验室安装专用的直排式通风系统。——310 防护服型实验室：需要配备专用的房间供风和排风系统。通风系统中的供风和排风部分相互平衡，以在实验室内产生由最小危险区流向最大潜在危险区的定向气流。应配备更强的排风扇，以确保设施内始终处于负压。必须监测防护服型实验室内部不同区域之间及实验室与毗连区域间的压力差。必须监测通风系统中供风和排风部分的气流，同时安装适宜的控制系统，以防止防护服型实验室压力上升。供风经HEPA过滤后输送至防护服型实验室、用于清除污染的浴室以及用于清除污染的气锁室或传递室内。防护服型实验室的排风必须通过两个串连的HEPA过滤器过滤后释放至室外，或者在经过两个HEPA过滤器过滤后循环使用，但仅限于防护服型实验室内。在任何情况下，四级生物安全水平实验室所排出的气体均不能循环至其他区域。如果选择在防护服型实验室内循环使用空气，那么在操作中要极度谨慎，必须要考虑所进行研究的类型、在防护服型实验室中所使用的仪器、化学品及其他材料，以及研究中所使用动物的种类。所有的HEPA过滤器必须每年进行检查、认证。HEPA过滤器支架的设计使得过滤器在拆除前可以原地清除污染。也可以将过滤器装入密封的、气密的原装容器中以备随后进行灭菌和∕或焚烧处理。4、污水的净化消毒。所有源自防护服型实验室、用于清除污染的传递间、用于清除污染的浴室或Ⅲ级生物安全柜的污水，在最终排往下水道之前，必须经过净化消毒处理。首选加热消毒（高压灭菌）法。污水在排出前，还需将pH310 值调至中性。个人淋浴室和卫生间的污水可以不经任何处理直接排到下水道中。5、废弃物和用过物品的灭菌。实验室内必须配备双门、传递型高压灭菌器。对于不能进行蒸汽灭菌的仪器、物品，应提供其他清除污染的方法。6、必须要有供标本、实验用品以及动物进入的气锁室。7、必须配备应急电源和专用供电线路。8、必须安装安全防护排水管。由于安全柜型或防护服型四级生物安全设施在工程、设计及结构方面的高度复杂性，这里没有给出此类设施的代表性图片。因为四级生物安全水平实验室中工作的高度复杂性，应单独制订详细的工作手册，并在培训中实验室生物安全手册24进行检查。此外还应制订应急方案（见第13章）。在制订应急方案的准备过程中，应与国家和地方的卫生主管机构积极协作。同时，也要包括消防、警察、定点收治医院等其他应急服务机构。25第6章实验动物设施310 因实验或诊断目的而使用动物的实验人员要有道德上的职责，尽量照顾好动物，应尽量避免给动物带来不必要的痛苦或伤害。同时必须为动物提供舒适、卫生的笼具和足量、卫生的食物、饮水。实验结束时，必须以仁慈方式处死动物。由于安全保障方面的原因，动物室应是一个独立分开的部分。如果它与实验室毗连，则设计上应当同实验室的公共部分分开，并便于清除污染与杀灭虫害。表４动物设施的防护水平：实验操作和安全设备汇总危险度等级防护水平实验室操作和安全设施1级ABSL-1限制出入，穿戴防护服和手套2级ABSL-2ABSL-1的操作加：危险警告标志。可产生气溶胶的操作应使用Ⅰ级或Ⅱ级BSC。废弃物和饲养笼具在清洗前先清除污染。3级ABSL-3ABSL-2的操作加：进入控制。所有操作均在BSC内进行，并穿着特殊防护服。4级ABSL-4ABSL-3的操作加：严格限制出入。进入前更衣。配备Ⅲ级BSC或正压防护服。离开时淋浴。所有废弃物在清除出设施前需先清除污染。ABSL：动物设施生物安全水平；BSC310 ：生物安全柜和实验室一样，动物设施主要根据所研究微生物的危险度评估结果和危险度等级命名为一级、二级、三级或四级动物设施生物安全水平。关于动物实验室中使用的微生物，需要考虑的因素包括：1、正常传播途径2、使用的容量和浓度3、接种途径4、能否和以何种途径被排出。关于动物实验室中使用的动物，需要考虑的因素包括：1、动物的自然特性，亦即动物的攻击性和抓咬倾向性2、自然存在的体内外寄生虫3、易感的动物疾病310 4、播散过敏原的可能性。和对实验室的要求一样，根据动物生物安全等级，在设计特征、设备、防范措施方面的要求的严格程度也逐渐增加，表4介绍并汇总了有关的要求，其所有指标具有累加性，即高等级标准中包括低等级的标准。实验室生物安全手册26动物设施——一级生物安全水平一级生物安全水平的动物设施适用于饲养大多数经过检疫的储备实验动物（灵长类除外，关于这类动物应向国家权威机构咨询），以及专门接种了危险度1级微生物的动物。要求应用微生物学操作技术规范（GMT310 ）。动物设施的主任必须制订动物操作和进入饲养场所应遵循的政策、规程和方案，为工作人员制订适宜的医学监测方案，制订并执行安全或操作手册。动物设施——二级生物安全水平二级生物安全水平的动物设施适用于专门接种了危险度2级微生物的动物，需要进行下列安全防护：1、必须符合一级生物安全水平动物设施的所有要求。2、在门及其他适宜的地方张贴生物危害警告标志（见图1）。3、设施的设计必须易于清洁和管理。4、门必须向内开，并可以自动关闭。5、要有适宜的温度、通风和照明。6、如果采用机械通风，则气流的方向必须向内。排出的空气要排到室外，不得在建筑物内循环使用。7、授权人员方可进入。8、仅接纳实验用动物。9、应制订节肢动物和啮齿类动物的控制方案。10、如有窗户，必须是安全、抗击碎的。如果窗户可以打开，则必须安装防节肢动物的纱网。11、使用后，工作表面应用有效的消毒剂来清除污染（见第14章）。12、可能产生气溶胶的工作必须使用生物安全柜（Ⅰ级或Ⅱ级）或隔离箱，隔离箱要带有专用的供气和经HEPA过滤的排气装置。13、动物设施的现场或附近备有高压灭菌器。14、清理动物的垫料时必须尽量减少气溶胶和灰尘的产生。15、所有废料和垫料在丢弃前必须先清除污染。16、尽可能限制锐利器具的使用。锐器应始终收集在带盖的防刺破容器中，并按感染性物质处理。17、进行高压灭菌、焚烧的物品应装在密闭容器中安全运输。18、动物笼具在使用后必须清除污染。19、动物尸体必须焚烧。20、在设施内必须穿着防护服和其他装备，离去时脱下。21、必须有洗手设施。人员离开动物设施前必须洗手。22、如发生伤害，无论程度轻重，必须进行适当的治疗，且要报告并记录。23、禁止在设施内进食、饮水、吸烟和化妆。24、所有人员必须接受适当的培训。第6章310 实验动物设施27动物设施——三级生物安全水平三级生物安全水平的动物设施适用于专门接种了危险度3级微生物的动物，或根据危险度评估结果来确定。所有系统、操作和规程每年都需要重新检查及认证。需要执行下列安全防护措施：1、必须符合一级和二级生物安全水平动物设施的所有要求。2、严格控制进入。3、设施必须通过由双门入口构成的缓冲间，以便与实验室的其他部分及动物房隔开。4、缓冲间内必须配备洗手设施。5、缓冲间内必须配备淋浴设施。6、必须采用机械通风，以确保连续的气流通过每个房间。室内空气排出到室外前，必须经HEPA310 过滤，不得循环使用。系统的设计必须可以防止意外逆流及动物室内出现正压。7、在存在生物学危害的动物室内，必须在方便的位置安装高压灭菌器。感染性废弃物在移至设施的其他区域前需高压灭菌。8、现场应当就近备有焚烧炉，或由主管部门另作安排。9、感染危险度3级微生物的动物的饲养笼具，必须置于隔离器或在笼具后装有通风系统排风口的房间中。10、垫料应尽量无尘。11、所有的防护服在洗烫前必须先清除污染。12、窗户必须关闭、封严、抗破损。13、工作人员应进行适当的免疫接种。动物设施——四级生物安全水平正常情况下，此类设施中的工作与四级生物安全水平的最高防护实验室中的工作有关，国家和地方的规章和规定必须协调以同时适用于这两种实验室。在防护服型实验室内工作时，除了这里所说明的要求外，还应符合其他规定（见第5章）。1、必须符合一级、二级及三级生物安全水平动物设施的所有要求。2、严格限制进入，只有主任指定的工作人员方有权进入。3、禁止单独工作，必须遵守双人工作制度。4、工作人员必须已经接受过最高水平的微生物学培训，熟悉其工作中所涉及的危险以及必要的预防措施。5、饲养感染危险度4级微生物因子的动物的区域，必须遵照四级生物安全水平的最高防护实验室的防护标准。6、必须通过气锁缓冲室才能进入设施，气锁缓冲室的洁净侧与限制侧之间必须由更衣室、淋浴室分开。7、进入设施时，工作人员必须脱下日常服装，并换上专用防护服。工作结束后，必须脱下防护服进行高压灭菌，淋浴后再离去。8、设施必须安装带有HEPA310 过滤器的排风系统进行通风，以确保室内负压（向内气流）。9、通风系统必须能防止气体逆流及出现正压。10、必须配备双门高压灭菌器来传递物品，洁净端在防护室外的房间内。实验室生物安全手册28310 11、必须配备传递气锁舱以供传递不能高压灭菌的物品，其洁净端在防护室外的房间内。12、在进行感染危险度4级微生物的动物的操作时，均必须在四级生物安全水平的最高防护实验室中进行。13、所有动物必须饲养在隔离器内。14、所有垫料和废弃物在清除出设施前必须经高压灭菌处理。15、工作人员必须进行医学监测。无脊椎动物和脊椎动物一样，动物设施的生物安全等级由所研究的或自然存在的微生物的危险度等级决定，或根据危险度评估结果来确定。对于某些节肢动物，尤其是飞行昆虫，必须另外采取如下的预防措施：1、已感染和未感染的无脊椎动物应分开房间饲养。2、房间能密闭进行熏蒸消毒。3、备有喷雾型杀虫剂。4、应配备制冷设施，以备必要时降低无脊椎动物的活动性。5、进入设施的缓冲间内应安装捕虫器，并在门上安装防节肢动物的纱网。6、所有通风管道和可开启的窗户均要安装防节肢动物的纱网。7、水槽和排水管上的存水弯管内不能干涸。8、所有废弃物应高压灭菌，因为对于某些无脊椎动物，任何消毒剂均不能将其杀死。9、对会飞、爬、跳跃的节肢动物的幼虫和成虫应坚持计数检查。10、放置蜱螨的容器应竖立置于油碟中。11、已感染或可能感染的飞行昆虫必须收集在有双层网的笼子中。12、必须在生物安全柜或隔离箱中操作已感染或可能感染的节肢动物。13、已感染或可能感染的节肢动物可以在冷却盘上操作。详细资料见参考文献3～6。29第7章实验室∕动物设施试运行指南310 实验室∕动物设施的试运行可以定义为：对已经完成安装、检查、功能测试的指定实验室的结构部分、系统和∕或系统的组成部分所进行的系统性检查，然后形成文件，证明其符合国家或国际标准。试运行合格的要求根据每一个建筑系统的设计标准和设计功能的不同而不同。换句话说，那些指定达到1～4级不同生物安全水平的实验室，其试运行要求也可能各有不同，并逐渐变得复杂。地质断层带以及极端热、冷或潮湿等地理和气候条件也可能影响实验室的设计，并因此影响试运行要求。在完成试运行以后，有关结构部分和支持系统应能满足可正常预期的、各种不同的操作条件和故障模式，这样方能得到批准。应尽早确立试运行程序和接受标准，最好是在建造或改建计划的规划阶段就确立好。在计划早期确认了试运行程序后，建筑师、工程师、安全和卫生人员以及实验室最终用户就能了解特定实验室的性能要求，并为实验室和∕或动物设施的性能指标设定统一的期望值。试运行程序为实验室所在机构和周围社区提供一个高度可信的保证，即实验室的结构、电力、机械和管道系统、防护和净化系统以及安全保障和警报系统将按设计要求运行，可以确保对特定实验室或动物设施中所操作的所有潜在危险性微生物提供有效的防护。试运行工作通常在实验室或动物设施的项目计划阶段就开始，并贯穿于整个施工过程和随后的保修期。保修期通常在设施起用后持续一年。一般推荐那些与参与该实验室设施的建筑和设计的建筑工程公司无关的单位作为试运行机构。试运行机构作为实验室建造或改建单位的支持者，可以认为是设计队伍中的成员；他们必须在计划早期参与工作。某些情况下，实验室所在单位也可以担任自己实验室的试运行机构。对于更为复杂的实验室设施（三级或四级生物安全水平），实验室所在机构可能希望从外面聘请那些对试运行复杂生物安全实验室和动物设施方面具有成功经验的试运行机构。在选择使用独立的试运行机构时，实验室所在机构仍然可以作为试运行队伍的一部分。除了试运行机构以外，实验室所在机构的安全官员、项目官员、计划经理以及操作和维护工作人员代表也推荐作为试运行队伍中的成员。下列各项虽然并非实验室系统和组成部分的全面内容，但在根据改建或建造的实验设施的防护水平来进行功能测试时，这些内容可能包括在该试运行计划中。明显地，实际的试运行计划将反映出正在计划中的实验室的复杂性。1、包括与远程监视和控制点相连接的建筑自动化系统2、电子监控和检测系统3、电子安全锁和接近装置阅读器4、暖气、通风（送风和排风）和空调（HVAC）系统5、高效空气（HEPA）过滤系统6、HEPA净化系统7、HVAC310 和排风系统控制以及互锁控制8、密封隔离调节阀9、实验室制冷系统10、锅炉和蒸汽系统实验室生物安全手册3011、火情探测、扑灭和警报系统12、市政水回流阻止器13、水处理系统（亦即反渗透蒸馏水）14、废水处理和中和系统15、管道排水引流系统16、化学除污系统17、医学实验室供气系统18、呼吸供气系统19、仪器设备供气系统20、实验室和支持区域不同级别压力差的验证21、局域网（LAN310 ）和计算机数据系统22、正常电源系统23、应急电源系统24、不间断电源系统25、应急照明系统26、照明固定装置的穿透密封27、电和机械设施的穿透密封28、电话系统29、气锁门互锁控制30、气密门密封31、窗户和可视面板的穿透密封32、屏障传递口穿透33、结构完整性查核：混凝土地板、墙及天花板34、隔离涂层的查核：地板、墙及天花板35、BSL4防护外壳的加压和隔离功能36、生物安全柜37、高压灭菌器38、液氮系统和警报器39、渗水监测系统（例如流入防护区）40、净化淋浴和化学添加剂系统41、笼具的洗涤和中和系统42、废弃物处理。31第8章实验室∕动物设施认证指南310 实验室是一个复杂而动态的环境。当今的生物医学研究和临床实验室必须能够快速适应不断发展的公共卫生需要和压力。一个典型的例子为，实验室需要调整重点以应付新出现的或重新出现的传染性疾病的挑战。为了确保这些动态实验室的环境能适应并维持在适当和安全的状态，所有生物学研究实验室和临床实验室都应该定期进行“认证”。实验室认证工作有助于确保：1、采用了正确的工程控制并能按设计正常运行2、适当的现场和规章的专门管理控制到位3、个体防护装备能满足所进行工作的要求4、充分考虑对废弃物和已用过材料的清除污染，适当的废弃物管理程序到位310 5、包括物理、电和化学安全的常规实验室安全程序到位。实验室认证与实验室试运行工作（第7章）在一些重要方面均有不同。实验室认证是对实验室内部的所有安全特征和过程（工程控制、个体防护装备以及管理控制）进行系统性检查。对生物安全操作和规程也要进行检查。实验室认证应定期进行，是一种不断进行的保证质量和安全的活动。受过充分培训的安全和卫生或生物安全专业人员可以进行实验室认证工作。实验室所在机构也可以雇用一些人员，他们有认证程序所需要的熟练的审核、考察和检查（这些名词术语可互用）的技能。但实验室所在机构也可以考虑或可能被要求让第三方来进行认证工作。生物医学研究实验室机构和临床实验室机构可以制订各种检查表格，以利于确保认证过程的一致性。这些表格应该有足够的灵活性，以适应不同实验室结构和程序上的差异，这些实验室需要在同一时间在实验室所在机构内部用统一的方法进行各种类型的工作。必须注意的是，只有经过适当培训的工作人员才允许使用这些表格，以使这些表格不会用来替代可靠的生物安全专业评估。表5～表7列出了这样一些表格的例子。检查结果应与实验室人员和管理者一起讨论。对于在检查过程中发现的所有不足之处，实验室应指定专人负责采取改正措施。在所有的不足之处妥善处理之后，实验室认证才算完成，实验室才能允许运行。四级生物安全水平实验室操作的复杂性超出了本手册的范围。有关这方面的详细资料，请与世界卫生组织的生物安全规划处1联络（见附录3）。——————————1WHOBiosafetyprogramme,DepartmentofCommunicableDiseaseSurveillanceandResponse,WorldHealthOrganization,20AvenueAppia,1211Geneva27,Switzerland(http://www.who.int/csr/).实验室生物安全手册32表5基础实验室——一级生物安全水平：实验室安全检查地点日期实验室管理人员检查项目（输入检查日期）是否310 不适用备注实验室适当的警示标志：紫外线、激光、放射性物质等………………………………………………供取阅并遵照执行的生物安全指南………实验室仪器正确标记（生物危害性、放射性、有毒等）……………………………………□□□□□□□□□生物安全水平：附上适当的生物安全检查表实验室设计设计易于清洁……………………………………房间的紫外灯安装互锁开关……………………所有架子都固定…………………………………实验台面防水，能耐酸、碱、有机溶剂和耐热………………………………………………提供足够的照明…………………………………有足够的储存空间并适当使用…………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□气瓶所有气瓶均固定…………………………………储备气瓶均套上安全帽…………………………窒息性气体和有毒气体的气瓶只置于通风房间………………………………………………310 有多余气瓶或空的气瓶…………………………□□□□□□□□□□□□化学品易燃物品储存在易燃物品专用储存柜中………过氧化物记录两组日期（收到和打开的日期）……………………………………………化学品之间正确隔开……………………………危害性化学品储存在目视水平线上方…………化学品放在地板上………………………………化学品容器敞口放置……………………………所有溶液均正确加以标记………………………使用水银温度计…………………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□第8章实验室∕动物设施认证指南33检查项目（输入检查日期）是否不适用备注冰箱∕冰柜∕冷库有食物……………………………………………易燃物品置于防爆∕安全装备中………………致癌性、放射性和∕或生物危害性物质的包装外有标签………………………………………310 冷库有紧急通道…………………………………□□□□□□□□□□□□电器存在延长线路……………………………………插座接地，极性正确……………………………在洗涤槽旁、淋浴器下方等处接线……………仪器电线有磨损或损坏…………………………超载的插座或接线板……………………………电源接线板架设在地板上………………………线路有合适的保险丝……………………………靠近水源的插座符合地方规定…………………电源线有接地……………………………………便携式空间加热器………………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□个体防护装备实验室内有洗眼设施……………………………有安全淋浴设施…………………………………有个体防护装备（手套、隔离衣、护目镜等）……………………………………………操作者正确着装…………………………………未穿实验外套、隔离衣、工作服、手套和其他个体防护服离开实验室………………………有低温保存的个体防护装备……………………□□□□□310 □□□□□□□□□□□□□废弃物处理废弃物不适当处理的证据………………………废弃物隔离放置在正确的容器中………………化学品废弃物的容器标注名称和日期并保持关闭………………………………………………化学品废弃物的容器适当处理并储存…………正确使用和处理盛放锐器的容器………………地板上没有垃圾…………………………………实验室内张贴废弃物处理程序…………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□实验室生物安全手册34检查项目（输入检查日期）是否不适用备注有职业保健和安全方案危害信息的交流…………………………………呼吸保护…………………………………………听力保护…………………………………………甲醛监测…………………………………………环氧乙烷监测……………………………………麻醉性气体监测…………………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□310 □一般工程控制实验室相对于普通地区、走廊及办公区为负压………………………………………………洗涤槽或排水槽用作排风口……………………有洗手池…………………………………………暴露的机器零件（滑轮、齿轮）………………实验室工作台上的真空管路装有过滤器和防泄阀………………………………………………供水系统存在逆流危险…………………………蒸馏水系统状况良好……………………………积极有效的虫害控制计划………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□一般操作及规程食品储存在实验室外…………………………微波炉上显著标记“不得用于处理食品，仅供实验使用”…………………………………在实验室内进食、饮水、吸烟和/或化妆………压力玻璃容器捆扎或加以防护（如使用真空气阀）……………………………………………禁止用嘴吸液……………………………………有机械吸液装置可供使用………………………实验室防护服与日常服装分开存放……………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□310 普通实验室维护玻璃容器存放在地板上…………………………差错危险明显……………………………………工作表面有洁净吸收垫…………………………破碎玻璃器皿用机械方法处理（扫帚和簸箕、钳子等）………………………………………□□□□□□□□□□□□第8章实验室∕动物设施认证指南35检查项目（输入检查日期）是否不适用不适用防火喷水龙头可以移动，无阻塞……………………墙壁、天花板、地板等有穿透开口………………线路或管道从门的开口穿过……………………实验室过道至少宽1m…………………………在管道系统或灯固定架上有物品存放…………310 实验室中储存了过量易燃物品…………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□可加热恒温浴装置有水位过低和过热断电保护………………用不可燃物质制造………………………………□□□□□□安全检查员签字：完成检查日期：实验室生物安全手册36表6基础实验室——二级生物安全水平：实验室安全检查。此表与一级生物安全水平实验室安全检查表一同使用。地点日期实验室管理人员检查项目（输入检查日期）是否不适用备注生物安全柜（BSC）去年进行了认证………………………………每次操作前后均用适当的消毒剂擦拭BSC表面……………………………………………前格栅和排风过滤器无阻塞…………………安全柜内使用明火……………………………真空管道有内置过滤器和消毒防气阀………房间气流及安放位置对BSC310 有影响……………当可能生成气溶胶时使用BSC…………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□日期：位置：商标：类型：序列号：实验室只有得到授权的人员方可进入………………只有告知了所有潜在危险的人员才能进入…在实验室门上张贴专门的生物危害标志……·使用现行、正确的标志……………………·标志清晰，外表无破损……………………所有门保持关闭………………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□清除污染专门针对所使用的微生物清除污染…………所有涉及感染性材料的溢出和意外事件均向实验室主管报告……………………………在清理溢出物时使用适当的清除污染剂……在每次操作前后、每天以及发生溢出之后，均清除工作表面的污染………………………□□□□□□□□□□□□污染废弃物的处理正确使用感染性废弃物的容器………………容器装得过满…………………………………310 容器正确标记并关闭…………………………培养物及其他受控制的废弃物在丢弃前正确清除了污染…………………………………在实验室外清除污染的材料按照当地规章和规定采用封闭、耐用、防漏的容器运输……□□□□□□□□□□□□□□□第8章实验室∕动物设施认证指南37检查项目（输入检查日期）是否不适用备注混合性废弃物在按化学和放射性废弃物一样处理之前先进行生物学净化处理…………□□□个体防护提醒实验室人员对所处理的微生物因子进行相应的免疫接种∕检查……………………联系适当的医学机构对职业暴露进行医学评估、监测和治疗……………………………操作感染性材料或污染仪器时戴手套………在BSC外面处理感染性材料时进行面部保护…摘除手套之后、操作完感染性微生物因子之后以及在离开实验室之前洗手………………310 有可以用于急救的抗菌药……………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□操作在可能生成感染性气溶胶或发生泼溅时使用BSC…………………………………………制订并采用生物安全手册……………………工作人员阅读、复习关于操作和规程的说明（包括安全手册和操作手册）并遵照执行（所有工作人员每年进行一次）……………按规程操作，以减少生成气溶胶或发生沷溅……………………………………………操作感染性微生物因子时使用针头锁闭注射器或一次性针头注射器……………………只在BSC中打开离心杯和转子…………………按照核准的运输规定采用核准的容器将感染性标本运出BSC………………………………□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□设施在靠近实验室出口处有洗手池………………□□□安全检查员签字：310 完成检查日期：实验室生物安全手册38表7防护实验室——三级生物安全水平：实验室安全检查。此表与一、二级生物安全水平的安全检查表一同使用。地点日期实验室管理人员检查项目（输入检查日期）是否不适用备注设施实验室与建筑物中的非限制区域分开………通过配有自动关闭门的缓冲间进出实验室…实验室内的所有穿透处均密封或可以封闭以清除污染……………………………………房间通过单一途径排风，并排离实验区域……有可控的通风系统以监测气流方向…………□□□□□□□□□□□□□□□个体防护在实验室内穿着反背衣………………………只在实验室区域穿着实验室防护服…………洗手池为脚动、肘动或自动控制……………□□□□□□□□□手的保护处理感染性材料、可能污染的仪器以及工作表面时，戴两层手套……………………………□□□310 呼吸保护当生物安全柜不能安全地控制气溶胶时，实验室中的所有工作人员均要佩戴呼吸保护装置……………………………………………□□□操作在生物安全柜外面进行感染性材料的工作时，提供黏膜保护………………………………将与微生物因子有关的特定危害告知工作人员……………………………………………要求工作人员阅读所有操作和规程的说明（包括安全手册或操作手册）并遵照执行………工作人员每年接受对规程更改部分的知识更新∕追加培训………………………………所有污染废弃物在处理之前先高压灭菌……□□□□□□□□□□□□□□□安全检查员签字：完成检查日期：39第二部分实验室生物安全保障40310 41第9章实验室生物安全保障的概念《实验室生物安全手册》过去一直把重点放在传统的实验室生物安全指导上。手册强调的是微生物操作技术规范的应用；适当的防护设备；正确的实验室设计、操作和维护；以及如何通过行政管理来减少工作人员受伤或患病的危险。在按照这些推荐意见执行时，对环境以及周围较大范围社区所造成的危险也可降到最低。目前必须通过引入实验室生物安全保障措施来丰富上述实现生物安全的传统方法。最近全球发生的一系列事件强调有必要保护实验室以及实验室内的材料，以免可能因故意行为而危害人类、家畜、农业或环境。在确定一个单位的实验室生物安全保障的需要之前，必须首先理解“实验室生物安全（laboratorybiosafety）”和“实验室生物安全保障（laboratory310 biosecurity）”之间的差异。“实验室生物安全”一词用来描述那些用以防止发生病原体或毒素无意中暴露及意外释放的防护原则、技术以及实践。“实验室生物安全保障”则是指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。有效的生物安全规范是实验室生物安全保障活动的根本。通过危险度评估工作（作为实验室所在机构生物安全方案中的一个组成部分来实施），可以收集关于所使用生物体的类型、它们的物理位置、需要接触这些生物体的人员以及负责这些生物体人员的身份等信息。这些信息可以用于评估一个单位是否拥有这样的生物材料，而这些生物材料对于那些企图不当使用它们的人具有诱惑力。应建立国家标准来明确国家和各单位在防止标本、病原体和毒素被滥用方面应负的责任。310 每个单位都必须根据本单位的需要、实验室工作的类型以及本地的情况等来制定和实施特定的实验室生物安全保障规划。因此，实验室生物安全保障活动应能代表所在单位的不同需求，必要时应由科技主管、研究负责人、生物安全官员、实验室的科研人员、后勤保障人员、管理人员、信息技术人员以及执法机构和安全机构的人员来参与。实验室生物安全保障措施应以对病原体和毒素负责任的综合方案为基础，其中应包括对病原体和毒素的贮存位置、进出人员资料、使用记录、设施内及设施间进行内部或外部运送的记录文件以及对材料进行任何灭活和∕或丢弃等情况的最新调查结果。同样地，应制定一个单位的实验室生物安全保障方案来鉴别、报告、调查并纠正实验室生物安全保障工作中的违规情况，包括调查结果中不符合规定的地方。应明确规定公共卫生和安全保障管理部门在发生违反安全保障事件时的介入程度、作用和责任。与实验室生物安全培训不同，所有人员都应进行实验室生物安全保障培训。通过培训可以帮助工作人员理解保护这些材料的必要性以及有关生物安全保障措施的原理，培训内容应包括复习有关国家标准和各单位的特殊规定。在培训过程中，还应说明在发生违反安全保障的事件时相关人员具有哪些安全保障的作用和责任。对于所有有权接触敏感材料的人员，考察他们在专业和道德方面是否胜任危险性病原体的工作，这也是有效的实验室生物安全保障活动的一个中心内容。总之，安全保障预防应该像无菌操作技术和其他微生物安全操作技术一样，成为实验室常规工作的一部分。实验室安全保障措施不应阻碍对参比材料、临床和流行病学标本以及临床或公共卫生调查中所需资料的有效共享。职能部门的安全保障管理不应过度干涉科研人员的日常活动，实验室都应当制订针对所操作微生物和动物危害的安全防护措施。在任何涉及处理或储存危险度3级和4级微生物的实验室（三级生物安全水平的防护实验室和四级生物安全水平的最高防护实验室），都必须有一份关于处理实验室和动物设施意外事故的书面方案。国家和／或当地的卫生部门要参与制订应急预案。意外事故应对方案意外事故应对方案应当提供以下操作规范：1、防备自然灾害，如火灾、洪水、地震和爆炸2、生物危害的危险度评估3、意外暴露的处理和清除污染310 4、人员和动物从现场的紧急撤离5、人员暴露和受伤的紧急医疗处理6、暴露人员的医疗监护7、暴露人员的临床处理8、流行病学调查9、事故后的继续操作。在制定意外事故应对方案时应考虑以下几方面问题：1、高危险度等级微生物的鉴定2、高危险区域的地点，如实验室、储藏室和动物房3、明确处于危险的个体和人群4、明确责任人员及其责任，如生物安全官员、安全人员、地方卫生部门、临床医生、微生物学家、兽医学家、流行病学家以及消防和警务部门5、列出能接受暴露或感染人员进行治疗和隔离的单位6、暴露或感染人员的转移7、列出免疫血清、疫苗、药品、特殊仪器和物资的来源8、应急装备的供应，如防护服、消毒剂、化学和生物学的溢出处理盒、清除污染的器材物品。微生物实验室应急程序刺伤、切割伤或擦伤受伤人员应当脱下防护服，清洗双手和受伤部位，使用适当的皮肤消毒剂，必要时进行医学310 处理。要记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录。潜在感染性物质的食入应脱下受害人的防护服并进行医学处理。要报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留68完整适当的医疗记录。潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。应当立即通知实验室负责人和生物安全官员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内（例如1h内）严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室（例如24h）。应张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在生物安全官员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。容器破碎及感染性物质的溢出应当立即用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。然后在上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间。然后将布、纸巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片应用镊子清理。然后再用消毒剂擦拭污染区域。如果用簸箕清理破碎物，应当对他们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。在所有这些操作过程中都应戴手套。310 如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭（例如30min）使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭（例如30min）。发生这两种情况时都应通知生物安全官员。随后的所有操作都应戴结实的手套（如厚橡胶手套），必要时可在外面戴适当的一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子，或用镊子夹着的棉花来进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内（见第14章）。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，然后回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭，并再次擦拭，然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。在可封闭的离心桶（安全杯）内离心管发生破裂所有密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。如果怀疑在安全杯内发生破损，应该松开安全杯310 盖子并将离心桶高压灭菌。另一种方法是，安全杯可以采用化学消毒。火灾和自然灾害在制定的应急预案中应包括消防人员和其他服务人员。应事先告知他们哪些房间有潜在的感染性物质。要安排这些人员参观实验室，让他们熟悉实验室的布局和设备，这都是十分有益的。发生自然灾害时，应就实验室建筑内和∕或附近建筑物的潜在危险向当地或国家紧急救助人员提出警告。只有在受过训练的实验室工作人员的陪同下，他们才能进入这些地区。感染性物质应收集在防漏的盒子内或结实的一次性袋子中。310 由生物安全人员依据当地的规定决定继续利用或是最终丢弃。紧急救助：联系对象69实验室生物安全手册在设施内应显著张贴以下电话号码及地址：1、研究所和实验室本身的电话及地址（打电话者或呼叫的服务人员可能不知道详细地址或位置）2、研究所所长或实验室主任3、实验室主管4、生物安全官员5、消防队6、医院／急救机构∕医务人员（如果可能，提供各个诊所、科室和∕或医务人员的名称）7、警察8、医学官员9、负责的技术员10、水、气和电的维修部门急救装备必须配备以下紧急装备：1、急救箱，包括常用的和特殊的解毒剂2、合适的灭火器和灭火毯建议配备以下设备，但可根据具体情况有所不同：1、全套防护服（连体防护服、手套和头套——用于涉及危险度3级和4级微生物的事故）2、带有能有效防护化学物质和颗粒的滤毒罐的全面罩式防毒面具（full-facerespirator）3、房间消毒设备，如喷雾器和甲醛熏蒸器4、担架5、工具，如锤子、斧子、扳手、螺丝刀、梯子和绳子6、划分危险区域界限的器材和警告标示。310 详细资料见参考文献12和310 28。70第14章消毒和灭菌消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。由于严重污染的物品不能迅速地消毒或灭菌，因此了解预清洁的基本原理也同样重要。关于消毒和灭菌，以下基本原则适用于所有已知不同级别的微生物病原体。关于清除污染的特殊要求，要根据实验工作的类型以及所操作的感染性物质的特性来决定。这里所提供的一般性资料，可用于建立标准的和更专门的程序，以处理特定实验室中所涉及的生物危害。消毒剂的作用时间因具体的品种和生产商而不同。因此，所有消毒剂使用的推荐意见均必须遵守生产商的说明。定义关于消毒和灭菌有许多不同的术语，下面是生物安全中较常用的：抗菌剂（antimicrobial）防腐剂（antiseptic）生物杀灭剂（biocide）化学杀菌剂（chemicalgermcide）清除污染（decontamination）消毒剂（disinfectant）消毒（disinfection）灭菌剂（microbicide）杀孢子剂（sporocide）灭菌（sterilization）310 能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂经常应用于体表。所有能够杀死生物体的制剂的统称。用于杀死微生物的化学品或化学混合物。去除和／或杀死微生物的任何过程。该词也用于去除或中和有危害的化学品和放射性物质。用于杀死微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀死其孢子。消毒剂常用于非生命物体或其表面。杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。能够杀死微生物的化学品或化学混合物。该词常常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。用于杀死微生物和孢子的化学品或化学混合物。杀死和／或去除所有微生物及其孢子的过程。实验室材料的清洁清洁是指去除污垢、有机物和污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿墩布拖擦。尘土、污物以及有机物是微生物的栖身之所，并可能影响除污染剂（抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂）的杀菌作用。310 必须通过预清洁才能实现消毒和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌71实验室生物安全手册活性。预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质。预清洁时必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质。非常普遍的是采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。化学杀菌剂多种化学品可以用作消毒剂和∕或防腐剂。由于其数量与种类还在不断增加，因此，要根据具体的用途认真选择。许多化学品在较高温度时其杀菌效果更快也更好。但同时，较高的温度能够加速其挥发和降解。因此在热带地区，由于室温较高，可能缩短化学杀菌剂的有效期，在使用和储存这些化学品时要特别注意。许多杀菌剂对人或环境有害，应当按生产商的说明小心地进行选择、贮存、操作、使用和废弃。为了个人的安全，建议在稀释化学杀菌剂时应戴手套、围裙和保护眼睛的器具。化学杀菌剂一般不用于地面、墙壁、设备和家具的常规清洁。但是，在控制疾病暴发时可以使用。正确使用化学杀菌剂可以确保实验场所的安全，减少来自感染性物质的危险。只要可能，出于经济原因、控制库存以及限制环境污染等的考虑，应尽可能控制所使用化学杀菌剂的量。下面介绍一些常规使用的化学杀菌剂，并列出它们的一般用途和安全特征。除非另外标注，310 杀菌剂的浓度用重量／体积（w/v）来表示。表12汇总了含氯消毒剂的推荐使用浓度。表12含氯消毒剂的推荐使用浓度“清洁”情况下a所需的有效氯浓度次氯酸钠溶液（含有5％的有效氯）次氯酸钙（含有70％的有效氯）二氯异氰尿酸钠粉剂（含60％的有效氯）二氯异氰尿酸钠片剂（每片含1.5g有效氯）氯胺（含有25％的有效氯）cabc“污染”情况下b0.5%（5g/L）100mL/L7.0g/L8.5g/L每升4片20g/L0.1%（1g/L）20mL/L1.4g/L1.7g/L每升1片20g/L去除大部分污染材料后溢流情况（如血液）或大量污染材料没有除去时参见正文氯（次氯酸钠）氯属于快速作用的氧化剂，是一种可广泛应用的广谱化学杀菌剂。它一般以次氯酸钠（NaOCl）溶液来作为漂白剂销售，使用时可以用水稀释成各种不同的有效氯浓度。310 氯（尤其用作漂白剂时）是强碱性的，能够腐蚀金属。有机物（蛋白质）会显著减弱其活性。如果在开口容器中储藏高浓度的或使用浓度的漂白剂，尤其在高温条件下，会释放氯气而减310 弱其杀菌能力。要根据漂白剂工作液的初始浓度、容器的类型（如有无盖子）和大小、使用的72第14章消毒和灭菌频率和特性以及室内条件，来确定它们的更换频率。一般而言，对于那些需要一天多次浸泡处理含有高浓度有机物的材料的漂白剂溶液，应当至少每天更换一次，而那些使用频率较低的漂白剂溶液，则可以维持一周时间。常规实验室消毒剂的有效氯浓度应为1g/L。推荐使用含有5g/L有效氯的更强作用的溶液来处理生物危害性物质的溢出以及含有大量有机物的情况。作为家用漂白剂的次氯酸钠溶液含有50g/L的有效氯，因此分别需要进行1﹕50或1﹕10的稀释来达到终浓度1g/L和5g/L。工业用漂白剂的次氯酸钠溶液含有近120g/L的有效氯，必须进行相应的稀释来达到上述浓度。次氯酸钙［Ca（ClO）2］的颗粒或片剂一般含有70%的有效氯。用颗粒或片剂配制浓度1.4g/L或7.0g/L的溶液，其有效氯浓度分别为1.0g/L和5g/L。不建议将漂白剂当作防腐剂使用，但可以用作普通目的的消毒剂以及用于浸泡非金属类的污染材料。在紧急情况下也可以用终浓度含1～2mg/L有效氯的漂白剂来消毒饮用水。310 氯气具有强毒性。因此漂白剂只能在通风良好的地方储存和使用。另外，漂白剂也不能与酸混合以避免氯气快速释放。氯的许多副产物可能对人体及环境有害，应该避免滥用含氯消毒剂，特别是漂白剂。二氯异氰尿酸钠二氯异氰尿酸钠（NaDCC）的粉剂含有60%的有效氯。用NaDCC粉剂配制的浓度为1.7g/L和8.5g/L的溶液将分别含有1g/L和5g/L的有效氯。NaDCC片剂一般每片含有1.5g的有效氯，将1片或4片溶于1升水将分别获得浓度约为1g/L和5g/L的溶液。粉剂或片剂的NaDCC储存既方便又安全。血液或其他生物危害性液体溢出时，可以使用固体NaDCC，并使其作用至少10min后再除去，然后对污染区进行进一步的清理。氯胺氯胺粉剂含有大约25％的有效氯。氯胺释放氯的速度比次氯酸慢，因此如果需要获得同次氯酸相同的效力，就需要较高的初始浓度。另一方面，有机物对氯胺溶液的影响没有次氯酸溶液那么大，在“清洁”和“污染”情况下都推荐使用20g/L的浓度。氯胺溶液实际上无臭味。但是，浸泡在氯胺中的物品必须要彻底清洗，以除去加入到氯胺-T310 （甲苯磺酰氯醛甲酰胺钠）粉剂中的填充剂的残留物。二氧化氯二氧化氯是一种高效的快速杀菌剂、防腐剂和氧化剂。经常有报道，认为其在浓度低于漂白，粉的含氯浓度时即具活性。二氧化氯作为气体是不稳定的，将分解为氯气（Cl2）和氧气（O2）并放热。然而，二氧化氯溶于水，并在水溶液中稳定。有两种方法可获得二氧化氯：（1）将盐酸（2）订购其稳定态，然后在需要（HCl）和亚氯酸钠（NaClO2）两种单独成分混合时即可生成；时随时活化生成。就氧化杀菌剂而言，二氧化氯是高选择性的氧化剂。臭氧和氯比二氧化氯有更高的反应活性，能氧化大多数的有机物。然而，二氧化氯仅同还原性硫化物、仲胺、叔胺以及其他强还原性和反应活性的有机物作用。因此，与使用氯和臭氧相比，二氧化氯在含量低得多的情况下，能得到更稳定的反应产物。在有机物较多的情况下，由于其选择性，使用适量的二氧化氯比臭氧和氯更有效。甲醛在温度高于20℃310 时，甲醛（HCHO）是一种能够杀死所有微生物及其孢子的气体。但甲醛73实验室生物安全手册对朊蛋白没有杀灭活性。甲醛起效相对较慢，并需要相对湿度达70％左右。市场上出售的产品为多聚甲醛——一种固体多聚体，呈薄片状或小块状，或为福尔马林——一种浓度约为370g/L（37％）的气体水溶液，其中含甲醇（100mL/L）作为稳定剂。两种形式加热都可以产生气体，用于封闭空间（如生物安全柜和房间）的清除污染和消毒（见本章“清除局部环境污染”部分）。甲醛（5％福尔马林水溶液）可以作为液体消毒剂。甲醛被怀疑是一种致癌剂。它具有刺鼻的气味，其气体能够刺激眼睛和黏膜，因此必须在通风橱或通风良好的地方储存和使用。必须遵守国家化学品安全规定。戊二醛象甲醛一样，戊二醛［OHC（CH2）3CHO］也对繁殖的细菌、孢子、真菌和含脂或不含脂的病毒具有活性。它不具有腐蚀性，比甲醛作用迅速，但也需要几个小时才能杀死细菌孢子。通常所供应的戊二醛是浓度约20g/L（2％）的溶液，绝大部分产品使用前需要加入与产品一同提供的碳酸氢盐混合物进行“活化”（变成碱性）。活化的溶液根据其配方设计、应用类型和使用频率等情况可以重复使用310 1～4周。与有些产品一同提供的指示计（dipstick）仅用于粗略指示溶液中的活性戊二醛水平。如果戊二醛溶液变混浊，就应当将其废弃。戊二醛具有毒性，并对皮肤和黏膜具有刺激性，应当避免与其接触。必须在通风橱或通风良好的地方使用。不建议采用其喷雾剂或溶液来清除环境表面的污染。必须遵守化学品安全的国家规定。酚类化合物酚类化合物是一大类最早使用的杀菌剂。但是，最近出于安全考虑而限制了它的使用。它们对繁殖细菌和含脂病毒具有活性，适当配制后，对分枝杆菌也有活性。它们对孢子没有活性，而对于非含脂病毒的活性则不确定。许多酚类产品可用于清除环境表面的污染，有些（如三氯生和氯二甲酚）是最常用的抗菌剂。三氯生常作为洗手用品。它主要对繁殖的细菌有活性，并且对皮肤和黏膜是安全的。但是，实验研究发现，对低浓度三氯生具有耐受性的细菌对某些抗生素也有耐受性。该领域中这一发现的意义还不清楚。有些酚类化合物对水的硬度敏感，并可能导致失活，因此必须使用蒸馏水或去离子水来进行稀释。310 不建议在食物接触的表面和幼儿活动场所使用酚类化合物。它们可能被橡胶吸收，也可能渗透皮肤。必须遵守国家化学品安全规定。季铵盐类化合物季铵盐类化合物大多混合使用，也经常与醇类等其他杀菌剂联合使用。季铵盐类化合物对繁殖的细菌和含脂类病毒具有良好活性。某些类型（如苯扎氯铵）也用作防腐剂。有些季铵盐类化合物的杀菌作用会受有机质、水的硬度以及阴离子去污剂的显著影响，因此当使用季铵盐化合物进行消毒时，要认真选择预清洁所用的品种。有些具有潜在危害性的细菌能够在季铵盐化合物溶液中生长。由于其生物降解能力较低，这些化合物也可能在环境中蓄积。乙醇（CH3）2CHOH］具有相似的灭菌特性。它们对于繁殖的细菌、310 乙醇（C2H5OH）和异丙醇［74第14章消毒和灭菌真菌和含脂病毒具有活性，但不能灭活孢子，而对非含脂病毒的作用则不确定。其水溶液最有效的使用浓度约为70％（v/v）；更高或更低的浓度均不适宜杀菌。醇类溶液的主要优点是处理后物品不会留下任何残留物。将乙醇与其他试剂混合使用比单独使用更有效，如70％（v/v）乙醇和100g/L的甲醛混合使用，以及使用含有2g/L有效氯的乙醇。70%（v/v）乙醇溶液可以用于消毒皮肤、实验台和生物安全柜的工作台面，以及浸泡小的外科手术器械。由于乙醇可以使皮肤干燥，所以经常与润滑剂混合使用。在不便于或不可能进行彻底洗手的情况下，推荐使用含乙醇的擦手液对轻度污染的手进行消毒。但是必须记住，乙醇对孢子无效，而且不能杀死所有类型的非含脂类病毒。乙醇是易挥发和易燃的，不能在明火附近使用。其工作液应储存在适当的容器内以避免醇类挥发。乙醇可以硬化橡胶并溶解某些胶质。为了避免乙醇用于其他非灭菌目的，在实验室里对乙醇进行专门的清点和储存是非常重要的。含有乙醇溶液的瓶子必须清楚标记以避免被意外高压310 灭菌。碘和碘伏这类消毒剂的作用与氯类似，只是有机质对它们的抑制作用略弱。碘可以使纤维和环境表面着色，一般不适合作为消毒剂。但是，碘伏和碘酊是很好的抗菌剂。多聚碘（polyvidoneiodine）是一种安全可靠的外科手术擦手剂和手术前皮肤抗菌剂。碘类抗菌剂一般不适于医疗／牙医器械的消毒。碘不能在铝或铜上使用。碘有毒性。含有有机碘的产品必须于4～10℃储存，以避免有潜在危害性的细菌在里面生长。过氧化氢和过氧乙酸像氯一样，过氧化氢（H2O2）和过氧乙酸（CH3COOOH）是强氧化剂，是一种广谱杀菌剂。对人和环境它们较氯更为安全。通常供应的过氧化氢是可以立即使用的3％的溶液，或是用无菌水稀释5～10倍体积后使用的30％的水溶液。但是，那种单独含有3～6％过氧化氢的溶液杀菌作用缓慢而有限。现有产品中含有其他成分来稳定过氧化氢，加速其杀菌作用并降低其腐蚀性。过氧化氢能够用于清除实验台和生物安全柜工作台面的污染，较高浓度的溶液适于清除对热敏感的医疗∕牙医器械的污染。采用过氧化氢或过氧乙酸熏蒸来消毒对热敏感的医疗／牙医器械310 时，需要特殊的设备。过氧化氢和过氧乙酸能腐蚀铝、铜、黄铜和锌等金属，也能使纤维、头发、皮肤及黏膜褪色。经它们处理的物品必须经过彻底的漂洗后才能接触眼睛和黏膜。它们应当储存在避热和避光的地方。清除局部环境的污染需要联合应用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。清除表面污染时可以使用次氯酸钠（NaOCl）溶液；含有1％有效氯的溶液适于普通的环境卫生设备，但是当处理高危环境时，建议使用高浓度（5g/L）溶液。用于清除环境污染时，含有3％过氧化氢的溶液也可以作为漂白剂的代用品。可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸气熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。产生甲醛蒸气前，房间的所有开口（如门窗等）都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21℃且相对湿度70%的条件下进行（见本章“清除生物安全柜的污染”部分）310 。75实验室生物安全手册清除污染时气体需要与物体表面至少接触8h。熏蒸后，该区域必须彻底通风后才能允许人员进入。在通风之前需要进入房间时，必须戴适当的防毒面具。可以采用气态的碳酸氢铵来中和甲醛。采用过氧化氢溶液对小空间进行气雾熏蒸同样有效，但需要专门的蒸气发生设备。清除生物安全柜的污染清除Ⅰ级和Ⅱ级生物安全柜的污染时，要使用能让甲醛气体独立发生、循环和中和的设备。应当将适量的多聚甲醛（空气中的终浓度达到0.8%）放在电热板上面的长柄平锅中（在生物安全柜外进行控制）。然后将含有比多聚甲醛多10%的碳酸氢铵置于另一个长柄平锅中（在生物安全柜外进行控制）。在柜外将该平锅放置到第二个加热板上，在安全柜外将电热板接上插头通电，以便需要时在柜外通过开关电源插头控制盘子的操作。如果相对湿度低于70％，在使用强力胶带［如管道胶带（ducttape）］密封前部封闭板前，还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热310 水的容器。如果前部没有封闭板，则可以用大块塑料布粘贴覆盖在前部开口和排气口以保证气体不会泄漏进入房间。同时供电线穿过前封闭板的穿透孔须用管道胶带密封。将放有多聚甲醛平锅的加热板插上插头接通电源。在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以断电。使生物安全柜静置至少6h。然后给放有第二个平锅的加热板插上插头通电，使碳酸氢铵蒸发。然后拔掉电插头，接通生物安全柜电源两次，每次启动约2秒钟来让碳酸氢铵气体循环。在移去前封闭板（或塑料布）和排气口罩单前，应使生物安全柜静置30min。使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。洗手／清除手部污染处理生物危害性材料时，只要可能均必须戴合适的手套。但是这并不能代替实验室人员需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前均必须洗手。大多数情况下，用普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就足够了。但在高度危险的情况下，建议使用杀菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓洗至少10秒钟，用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干（如果有条件，可以使用暖风干手器）。推荐使用脚控或肘控的水龙头。如果没有安装，应使用纸巾或毛巾来关上水龙头，以防止再度污染洗净的手。310 如上所述，如果没有条件彻底洗手或洗手不方便，应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。热力消毒和灭菌加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。“干”热没有腐蚀性，可用来处理实验器材中许多可耐受160℃或更高温度2～4h的物品。燃烧或焚化（见下）也是一种干热方式。高压灭菌的湿热法则最为有效。煮沸并不一定能杀死所有的微生物或病原体，但如果其他方法（化学杀菌、清除污染、高压灭菌）不可行或没有条件时，也可以作为一种最起码的消毒措施。灭菌后的物品必须小心操作并保存，以保证在使用之前不再被污染。高压灭菌压力饱和蒸汽灭菌（高压灭菌）是对实验材料进行灭菌的最有效和最可靠的方法。对于大310 多数目的，下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果：76第14章消毒和灭菌1、134℃、3min2、126℃、10min3、121℃、15min4、115℃、25min下面是不同高压灭菌器的例子。重力置换式（“下排气式”）高压灭菌器图10是重力置换高压灭菌器的整体构造。蒸汽在压力作用下进入灭菌器，由上而下置换较重的空气并通过灭菌器的排气阀（装有HEPA过滤器）排出。预真空式高压灭菌器这样的灭菌器可以在蒸汽进入前使空气从灭菌器排出。气体是通过一个装有HEPA过滤器的排气阀排出。在灭菌结束时，蒸汽自动排出。这种高压灭菌可以在134℃下进行，因此灭菌周期可以缩短至3min。预真空式高压灭菌器对于多孔性物品的灭菌很理想，但由于要抽真空而不能用于液体的高压灭菌。燃料加热压力锅式高压灭菌器310 只有在没有重力置换式高压灭菌器的情况下才使用这一种灭菌器。从其顶部装载物品，通过燃气、电力或其他燃料来加热。通过加热容器底部的水来产生蒸汽，由下而上置换空气并经排气孔排出。当所有的空气排出后，关闭排气孔的阀门，缓慢加热使压力和温度上升到安全阀预置的水平。此时记为灭菌开始时间。灭菌结束后停止加热，让温度下降到80℃以下再打开盖子。图10310 重力置换高压灭菌器高压灭菌器的装载为了利于蒸汽的渗透和空气排出，高压灭菌物品应松散包装放置在灭菌器内。要使蒸汽能够77实验室生物安全手册作用到其内容物。高压灭菌器使用注意事项下列规定能够减小操作压力容器时会发生的危害：1、应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。2、预防性的维护程序应包括：由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。3、应使用饱和蒸汽，并且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这些物质可能污染正在灭菌的物品。4、所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中；灭菌器柜腔装载要松散，以便蒸汽可以均匀作用于装载物。5、当灭菌器内部加压时，互锁安全装置可以防止门被打开，而没有互锁装置的高压灭菌器，应当关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下时再打开门。6、当高压灭菌液体时，由于取出液体时可能因过热而沸腾，故应采用慢排式设置。7、即使温度下降到80℃以下，操作者打开门时也应当戴适当的手套和面罩来进行防护。8、在进行高压灭菌效果的常规监测中，生物指示剂或热电偶计应置于每件高压灭菌物品的中心。最好在“最大”装载时用热偶计和记录仪进行定时监测，以确定灭菌程序是否恰当。310 9、灭菌器的排水过滤器（如果有）应当每天拆下清洗。10、应当注意保证高压灭菌器的安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。焚烧在处理那些经过或事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物时，焚烧是一种有效的方法（见第3章）。只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下，才能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。需要有效控制温度，并配备二级焚烧室时才能实现彻底焚烧。许多焚烧炉，尤其是那些只有单个焚烧室的，不能满足处理感染性物质、动物尸体和塑料制品的要求。这些材料可能不能完全销毁，微生物、有毒化学品和烟尘还可能通过烟囱排放而污染大气。但也有许多结构令人满意的焚烧室。理想的是一级焚烧室的温度至少应达到800℃，二级焚烧室的温度至少应达到1000℃。需要焚烧的材料（即使事先已清除污染）应当用袋子运送到焚烧室，最好使用塑料袋。负责焚烧的工作人员应当接受关于如何装载和控制温度等的正确指导。还需要注明的是，焚烧炉的操作是否有效主要取决于对需要处理的废弃物中物品的正确混合。310 人们已经关注到现有的或计划制造中的焚烧炉可能对环境造成的负面影响，并正努力使焚烧炉对环境的影响更小，也更节约能源。废弃物处理实验室和医学废弃物的处理要遵守各个地区、国家和国际的规定，在设计和执行关于生物危害性废弃物处理、运输和废弃的规划之前，必须参考最新版的相关文件。一般情况下，焚烧炉内的灰烬可以作为普通家庭废弃物处理并由地方有关部门运走。高压灭菌过的废弃物可以在其他地方焚烧后处理，或在指定垃圾场掩埋处理（见第3章）。详细资料见参考文献13和310 29～39。78第15章感染性物质的运输感染性及潜在感染性物质的运输要严格遵守国家和国际规定。这些规定描述了如何正确使用包装材料，以及其他的运输要求。实验室人员必须按照可适用的运输规定来运送感染性物质。按照规定执行可以实现：1、减少包装受损和泄漏的可能性，因此2、减少可能造成传染的暴露；3、提高运输效率。国际运输规定感染性物质运输规定（按各种运输方式）以联合国“危险性货物运输”的规章范本[40]为基础。联合国的这些推荐意见是由危险性货物运输的联合国专家委员会（UnitedNationsCommitteeofExportsontheTransportofDangerousGoods，UNCETDG）制定的。要成为法律上的规章合法的一部分，必须由有资格的权威机构将联合国规章范本应用到国家规定和国际规章范本中［例如国际民用航空组织（InternationalCivilAviationOrganization，ICAO）针对危险性货物运输制订的《危险性货物安全空运的技术说明》（TechnicalInstructionsfortheSafe310 TransportofDangerousGoods和《国际危险性货物陆运欧洲协议》［theEuropeanAgreementconcerningtheInternationalbyAir[41]）CarriageofDangerousGoodsbyRoad（ADR）[42]］。国际空运协会（InternationalAirTransportAssociation，IATA）每年发布《感染性物质运输指南》（InfectiousSubstancesShippingGuidelines）”[43]。IATA指南必须以遵守ICAO的技术说明作为最低标准，但可以增加其他要求。如果IATA成员运输上述物品，则必须遵守IATA指南。由于联合国关于危险性货物运输的规章范本每二年修订一次，读者应参照国家和国际规章范本的最新版本。[40]世界卫生组织为UNCETDG提供咨询。联合国关于感染性物质运输规章范本第13版（2003）采纳了运输规定中的主要变化。可以从WHO[44]得到关于修正案采纳的背景的有关说明。国际规章范本并非要取代各地方或国家要求。但在有些还没有国家要求的情况下，就应遵守国际规章范本。310 注意以下这一点非常重要：感染性物质的国际运输还必须依据并遵守国家进∕出口的规定。基本的三层包装系统在感染性及潜在感染性物质运输中选择使用的三层包装系统，其示意图见图11。这一包装系统由三层组成：内层容器，第二层包装以及外层包装。装载标本的内层容器必须防水、防漏并贴上指示内容物的适当标签。内层容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便内层容器打破或泄漏时，能吸收溢出的所有液体。防水、防漏的第二层包装用来包裹并保护内层容器。有些包装好的内层容器可以放在独立的310 第二层包装中。有些规定中包括了感染性物质包装的体积及重量限度。79实验室生物安全手册A类感染性物质的包装与标签B类感染性物质的包装与标签图11三层包装系统实例（图片由IATA,Montreal,310 Canada提供）80第15章感染性物质运输介绍第三层包装用于保护第二层包装在运输过程中免受物理性损坏。按照最新规定的要求，还应提供能够识别或描述标本的特性，以及能够识别发货人和收货人的标本资料单、信件和其他各种资料，以及其他任何所需要的文件。联合国规章范本规定使用两种不同的三层包装系统。基本的三层包装系统用于运输多数感染性物质；但那些高危险度的生物体则必须按更严格的要求进行运输。关于如何根据运输材料来选用不同包装的详细资料，建议读者参考国家和∕或国际的规章范本。溢出清除程序当发生感染性或潜在感染性物质溢出时，应采用下列溢出清除规程：1、戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护。2、用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。3、向纸巾上倾倒适当的消毒剂，并立即覆盖周围区域（通常可以使用5%漂白剂溶液；但在飞机上发生溢出时，则应该使用季铵类消毒剂）。4、使用消毒剂时，从溢出区域的外围开始，朝向中心进行处理。5、作用适当时间后（例如30min），将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器，则310 要使用簸箕或硬的厚纸板来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。6、对溢出区域再次清洁并消毒（如有必要，重复第2～5步）。7、将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物处理容器中。310 8、在成功消毒后，通知主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。81实验室生物安全手册82第五部分生物技术介绍8384第16章生物安全和重组DNA技术重组DNA技术涉及到组合不同来源的遗传信息，从而创造自然界以前可能从未存在过的遗传修饰生物体（geneticallymodifiedorganisms，GMOs）。最初，在分子生物学家中有人担心这些生物体可能具有不可预测的不良性状，一旦从实验室逸出将带来生物学危害。这种担心在1975年美国加利福尼亚州阿西洛马市召开的科学会议[45]上成为焦点。在那次会议上讨论了重组DNA技术的安全问题并提出了第一个重组DNA技术指南。接下来25年多的研究经验证实，在进行了适当的危险度评估并采用了适当的安全措施以后，可以安全地进行遗传工程工作。重组DNA技术或遗传工程最初是用来将DNA片段克隆到微生物宿主中，以过表达特定的基因产物用于进一步研究。重组DNA分子也已经用于获得遗传修饰生物体，如转基因和“基因敲除”动物以及转基因植物。重组DNA技术已经对生物学和医学产生巨大影响，并且由于整个人类基因组的核酸序列已经被了解，极可能会产生更大的影响。成千上万种未知功能的基因将采用重组DNA技术来进行研究。310 基因治疗可能成为某些疾病的常规疗法，采用遗传工程技术将可以设计出许多新的基因转移载体。同样地，采用重组DNA技术获得的转基因植物将可能在现代农业中扮演日益重要的角色。涉及到构建或使用GMOs的实验应首先进行生物安全评估。与该生物体有关的病原特性和所有潜在危害可能都是新型的，没有确定的。供体生物的特性、将要转移的DNA序列的性质、受体生物的特性以及环境特性等都需要进行评估。这些因素将有助于决定安全操作目标遗传修饰生物体所要求的生物安全水平，并确定应使用的生物学和物理防护系统。生物表达系统的生物安全考虑生物表达系统由载体和宿主细胞组成。必须满足许多标准使其能有效、安全地使用。质粒pUC18是这样一种生物表达系统的实例。质粒pUC18经常与大肠杆菌K12细胞一起使用作为克隆载体，其完整测序已经完成。所有需要在其他细菌表达的基因已经从它的前体质粒pBR322中删除。大肠杆菌K12是一种非致病性菌株，它不能在健康人和动物的消化道中持久克隆。如果所要插入的外源DNA表达产物不要求更高级别的生物安全水平，那么大肠杆菌K12/pUC18可以在一级生物310 安全水平下按常规的遗传工程实验进行。表达载体的生物安全考虑下列情况需要较高的生物安全水平：1、来源于病原生物体的DNA序列的表达可能增加GMO的毒性2、插入的DNA序列性质不确定，例如在制备病原微生物基因组DNA库的过程中3、基因产物具有潜在的药理学活性4、毒素的基因产物编码。用于基因转移的病毒载体病毒载体（腺病毒载体）可以用于将基因有效地转移到其他细胞。这样的载体缺少病毒复制310 的某些基因，可以在能够补充这些缺陷的细胞株内繁殖。85实验室生物安全手册这类病毒载体的贮存液中可能污染了可复制病毒，它们是由繁殖细胞株中极少发生的自发性重组产生的。这些载体操作时应采用与用于获得这些载体的母体腺病毒相同的生物安全水平。转基因动物和“基因敲除”动物携带外源性遗传信息的动物（转基因动物）应当在适合外源性基因产物特性的防护水平下进行操作。特定基因被有目的地删除的动物（“基因敲除”动物）一般不表现特殊的生物危害。包括那些表达病毒受体的转基因动物一般不会感染该种系病毒。如果这种动物从实验室逃离并将转移基因传给野生动物群体，那么理论上可以产生储存这些病毒的动物宿主。目前已经就脊髓灰质炎病毒，特别是与根除脊髓灰质炎相关的问题讨论了上述可能性。由不同实验室获得的表达人脊髓灰质炎病毒受体的转基因小鼠，它们对不同接种途径的脊髓灰质炎病毒的感染都很敏感，所产生的疾病在临床和组织病理学上也与人脊髓灰质炎相类似。但小鼠模型与人不同的是，在口腔接种脊髓灰质炎病毒后，肠道内的病毒复制不充分或没有发生。因此，如310 果这种转基因小鼠逃到野外，几乎不可能产生脊髓灰质炎病毒新的宿主动物。但是，这个例子表明，对于每一种新的转基因动物，应当通过详细研究来确定动物的感染途径、感染所需的病毒接种量以及感染动物传播病毒的范围。此外，应当采取一切措施以确保对受体转基因小鼠的严密防护。转基因植物那些表达了能够耐受除草剂或抵抗昆虫能力等基因的转基因植物，目前在世界许多地区都引起相当的争议。这些争议的焦点是这类植物作为食物的安全性，以及种植后的长期生态后果。表达动物或人源性基因的转基因植物用于研发医学产品和营养物品。通过危险度评估可以确定这些转基因植物产品所需的生物安全水平。遗传修饰生物体的危险度评估对与遗传修饰生物体（GMOs）有关的工作进行危险度评估时，应考虑供体和受体∕宿主生物体的特性。310 所需考虑的特性包括以下几方面：插入基因（供体生物）所直接引起的危害当已经知道插入基因产物具有可能造成危害的生物学或药理学活性时，则必须进行危险度评估，例如：1、毒素2、细胞因子3、激素4、基因表达调节剂5、毒力因子或增强子6、致瘤基因序列7、抗生素耐药性8、变态反应原。310 在考虑上述因素时，应包括达到生物学或药理学活性所需的表达水平的评估。与受体∕宿主有关的危害86第16章生物安全和重组DNA技术1、宿主的易感性2、宿主菌株的致病性，包括毒力、感染性和毒素产物3、宿主范围的变化4、接受免疫状况5、暴露后果。现有病原体性状改变引起的危害许多遗传修饰并不涉及那些产物本身有害的基因，但由于现有非致病性或致病性特征发生了变化，导致可能出现不利的反应。正常的基因修饰可能改变生物体的致病性。为了识别这些潜在的危害，应考虑下列几点（但不限于以下几点）：1、感染性或致病性是否增高？2、受体的任何失能性突变是否可以因插入外源基因而克服？3、外源基因是否可以编码其他生物体的致病决定簇？4、如果外源DNA确实含有致病决定簇，那么是否可以预知该基因能否造成GMO的致病性？5、是否可以得到治疗？6、GMO对于抗生素或其他治疗形式的敏感性是否会受遗传修饰结果的影响？7、是否可以完全清除GMO？进一步的考虑采用动物或植物整体进行实验研究时，也需要小心考虑。研究工作要遵守所在国家及单位从310 事GMOs工作的有关规定、限制和要求。各个国家都有自己的专家，他们制订从事GMOs工作的指南，并帮助科学家将他们的工作按适当的生物安全水平进行分类。有些情况下，不同国家之间的分类可能不同，或者当知道某些载体／宿主系统的新信息时，会将相关工作归入更高或更低的生物安全水平。危险度评估是一种动态发展的工作，它必须考虑到科学的最新进展。进行适当的危险度评估可以确保人类在未来继续得益于重组体DNA技术。310 详细资料见参考文献17和46～48。87实验室生物安全手册医药技术社区WWW.MSP123.CN310 致力于医药技术第一社区88第六部分化学品、火和电的安全89http://www.pharmst.cn医&药社区关注医药发展医药310 做医药人自己的网站90第17章危害性化学品在微生物学实验室中的工作人员不仅会接触致病微生物，也会接触化学品，因此让他们充分了解这些化学品的毒性作用、暴露途径以及可能与操作和储存这些化学品有关的危害（见附录5）是至关重要的。可以从化学品生产商和∕或供应商那里得到有关的物质安全资料卡（materialsafetydatasheets，MSDS）或其他有关化学危害的资料。在使用这些化学品的实验室中，应可方便查阅上述资料，例如可以将其作为安全手册或操作手册的一部分。暴露途径人们可能通过下列方式暴露于危险性化学品：1、吸入2、接触3、食入4、针刺310 5、通过破损皮肤。化学品的储存实验室应该只保存满足日常使用量的化学品。大量的化学品应储存在专门指定的房间或建筑物内。化学品不应按字母顺序存放。关于不相容化学品的一般原则为了避免发生火灾和∕或爆炸，表13中左边一栏的物质在贮存和操作中应避免接触表13中相应的右边一栏里的物质。表13关于不相容化学品的一般原则化学物质类别碱金属，如钠、钾、铯以及锂卤素醋酸、硫化氢、苯胺、烃、硫酸不相容化学品二氧化碳、氯代烃、水氨、乙炔、烃氧化剂，如铬酸、硝酸、过氧化物、高锰酸盐化学品的毒性作用在操作某些化学品或吸入它们的蒸气时会对人体健康产生不良影响。除了众所周知的毒性物310 质以外，已知许多化学品都有不同的毒性作用，可能对呼吸系统、血液、肺、肝脏、肾脏和胃肠91实验室生物安全手册道系统以及其他器官和组织造成不良影响或严重损害，而有些化学品具有致癌性或致畸性。有些可溶性蒸气在吸入后是有毒性作用的。除了上面所提到的许多严重影响外，发生暴露时还可能导致一些不能被立即识别的对人体健康的损伤，其中可能包括协调性差、嗜睡及类似的症状，并使出现事故的可能性增大。长期反复接触许多液态有机溶剂可能造成皮肤损害，这可能是由于有机溶剂的去脂效果，另外还可能出现过敏和腐蚀症状。关于化学品毒性作用的详细情况见附录5。爆炸性化学品叠氮化物通常用作溶液中的抗菌剂，由于轻微碰撞就可能造成叠氮化铜的猛烈爆炸，因此叠氮化物不应该与铜或铅（如污水管以及管道设施）接触。乙醚老化和干燥形成结晶后极不稳定，可能会爆炸。高氯酸如果在木制品、砌砖或纤维性物质上干燥时，一旦碰撞会发生爆炸并引起火灾。310 苦味酸和苦味酸盐在加热和撞击时会发生爆炸。化学品溢出实验室化学品的大多数生产商都会发行描述化学品溢出处理的示意图，溢出处理的示意图和工具盒都能买到。应该将适当的示意图张贴在实验室中显著的位置，并应配备下列物品：1、化学品溢出处理工具盒2、防护服，例如耐用橡胶手套、套鞋或橡胶靴、防毒面具3、铲子和簸箕4、用于夹取碎玻璃的镊子5、拖把、擦拭用的布和纸6、桶7、用于中和酸及腐蚀性化学品的苏打（碳酸钠，Na2CO3）或碳酸氢钠（NaHCO3）8、沙子（用于覆盖碱性溢出物）9、不可燃的清洁剂。当发生大量化学品溢出时，应该采取下列措施：1、通知有关的安全官员2、疏散现场的闲杂人员3、密切关注可能受到污染的人员4、如果溢出物是易燃性的，则应熄灭所有明火，关闭该房间中以及相邻区域的煤气，打开窗户（可能时），并关闭那些可能产生电火花的电器5、避免吸入溢出物品所产生的蒸气6、如果安全允许，启动排风设备7、提供清理溢出物的必要物品（参见上面）。压缩气体和液化气关于压缩气体和液化气的情况见表310 14。92第17章危害性化学品表14压缩气体和液化气的贮存容器压缩气体钢瓶和液化气容器a,b贮存要求·应该安全地固定（例如用铁链锁住）在墙上或坚固的实验台上，以确保钢瓶不会因为自然灾害而移动。·运输时必须戴好盖帽，并用手推车运送。·大储量钢瓶应存放在与实验室有一定距离的适当设施内。存放地点应上锁并适当标识。·不应放置在散热器、明火或其他热源或会产生电火花的电器附近，也不应置于阳光直晒下。小型、单次使用的气体钢瓶a,bab·不得焚烧。当这些设备及房间不使用时，应该关闭主高压阀门。使用和/或存放易燃气体钢瓶的房间应在门上用警示标志标明。详细资料见参考文献1和49～51以及附录310 5。93第18章其他实验室危害实验室人员可能要面对与能量形式有关的危害，包括火、电、辐射以及噪声。本章分别介绍这些危害的基本情况。火的危害实验室安全官员与地方消防官员之间的紧密合作是极为必要的。除了化学危害以外，也必须考虑火对感染性物质播散的可能影响。这将可能决定灭火或控制火灾何为最佳。最好由地方消防官员协助对实验室成员进行火灾发生时的应急行动和如何使用消防器材等方面的消防培训。在每个房间、走廊以及过道中应设置显著的火警标志、说明以及紧急通道标志。在实验室中引起火灾的通常原因包括：1、超负荷用电2、电器保养不良，例如电缆的绝缘层破旧或损坏3、供气管或电线过长4、仪器设备在不使用时未关闭电源5、使用不是专为实验室环境设计的仪器设备6、明火7、供气管老化锈蚀8、易燃、易爆品处理、保存不当9、不相容化学品没有正确隔离10、在易燃物品和蒸气附近有能产生火花的设备11、通风系统不当或不充分。310 消防器材应放置在靠近实验室的门边，以及走廊和过道的适当位置。这些器材应包括软管、桶（用于装水和沙子）以及灭火器。灭火器要定期进行检查和维护，使其维持在有效期内。不同类型和用途的灭火器见表15。表15灭火器的类型和用途种类水CO2气体灭火器干粉可应用于纸、木质纤维易燃液体和气体、电火灾易燃液体和气体、碱金属、电路和电器火灾易燃液体不能应用于电路和电器火灾、易燃液体、金属燃烧碱金属、纸可重复使用的仪器和设备，因为其残渣难以清除干净310 电火灾泡沫94第18章其他实验室危害详细资料见参考文献49。电的危害对所有电器设备都必须定期进行检查和测试，包括接地系统。在实验室电路中要配置断路器和漏电保护器。断路器不能保护人，只是用来保护线路不发生电流超负荷从而避免火灾。漏电保护器用于保护人员避免触电。实验室的所有电器均应接地，最好采用三相插头。实验室的所有电器设备和线路均必须符合国家电气安全标准和规范。噪声长期受过度噪声影响对人体是一种隐患。有些类型的实验室仪器（例如某些激光系统以及饲养动物的设施）能产生显著噪声，造成工作人员的暴露。可以通过噪声检测来确定噪声的危害。在资料显示噪声能控制达标的地方，可以考虑采用工程控制（例如在嘈杂仪器周围或在嘈杂区域与其他工作区域之间采用隔音罩或屏障的方法）。在不能控制噪声水平的地方，以及在按常规实验室工作人员会有过度噪声暴露的地方，就要制订听力保护方案（包括在噪声危害区域工作时的310 听力保护）以及用于确定噪声对工作人员影响的医学监测方案。电离辐射辐射保护可以保护人员免受电离辐射伤害，包括：1、对身体的影响，例如暴露人员可以观察到临床症状。辐射对身体的影响包括癌症（例如白血病、骨癌、肺癌以及皮肤癌），并可能在辐射暴露后许多年才发生。对身体不很严重的影响还包括轻度的皮肤损伤、脱发、贫血、胃肠系统损伤以及白内障。2、对遗传的影响，例如可以在暴露人员的后代中观察到症状。生殖腺辐射暴露对遗传的影响包括染色体损害或基因突变。生殖腺的生殖细胞在受到高剂量辐射时能引起细胞死亡，从而对人造成生育能力的损害，对女性还造成月经改变。发育期胎儿（特别是8～15周龄胎儿）暴露时，可能增加先天性畸型的危险，或增加以后发生精神损害或辐射诱发的癌症的危险。电离辐射保护原则为了限制电离辐射对人体的有害影响，应该控制使用放射性同位素，并遵守相应的国家标准。辐射防护的管理需要遵循以下四项原则：1、尽可能减少辐射暴露的时间2、尽可能增大与辐射源之间的距离3、隔离辐射源4、用非放射测量技术来取代放射性核素。310 保护性措施包括以下几方面。1、时间。可以通过下列方法来减少放射性物质操作过程中实验暴露的时间：·不使用放射性核素来进行新的技术和不熟悉的技术工作，直到操作熟练为止·操作放射性核素要从容、适时，不能急躁·确保在使用完毕后立即将所有放射源回收并储藏好·清除实验室内放射性废弃物的周期要短310 在辐射区或实验室停留尽可能少的时间95·实验室生物安全手册·进行必要的训练以最有效地安排时间，并对与放射性材料有关的实验操作进行适当计划根据下述公式，在辐射区域所花的时间愈少，个人受照射剂量就愈小：剂量＝剂量率×时间2、距离。对于大多数γ-和χ-射线来讲，剂量率与同辐射源之间的距离的平方成反比：剂量率＝常数∕距离2与辐射源之间的距离增大一倍，相同时间内的暴露将减少为四分之一。采用各种不同的装置和机械方法来增加操作人员与辐射源之间的距离，例如长柄的钳子、镊子、螺丝钳以及远程移液器。要注意距离的少量增加就可能造成剂量率的显著降低。3、屏蔽。在辐射源与实验室的操作人员或其他人员之间放置用于吸收或减弱辐射能量的防辐射屏蔽，有助于控制人员的辐射暴露。防辐射装置材料和厚度的选择取决于辐射的穿透能力（类型和能量）。1.3～1.5cm厚的丙烯酸树脂屏障、木板或轻金属可以对高能量的β粒子提供屏障保护，而高能量的γ-射线和χ-射线则需要高密度铅才能提供保护。4、替代方法。当有其他技术可用时，不应使用放射性核素物质。如果没有替代方法，则应310 使用穿透力或能量最低的放射性核素。放射性核素工作的安全操作规范从事放射性物质工作的规则应包括以下四个方面的考虑：1、辐射区域2、实验区域3、放射性废弃物区域4、记录和应急反应一些最重要的规则包括以下几方面：1、辐射区域····只能在指定区域使用放射活性物质，只允许必要的工作人员参与，使用个体防护装备（包括实验室工作服、安全眼镜以及一次性手套），监测实验人员的辐射暴露使用放射性核素的实验室应设计成便于防护、清洁和清除污染。放射性核素的操作区域应位于与主实验室邻接的小房间里，或位于远离其他设施的实验室指定区域。辐射区域的入口处应张贴国际辐射标志（图12）。图12310 国际辐射标志96第18章其他实验室危害2、实验区域······使用溢出盘，内衬一次性吸收材料。限制放射性核素的用量。在辐射区域、工作区域以及放射性废弃物区域设置辐射源的隔离防护装置。辐射容器用辐射标志标示（包括放射性核素种类、活性及检测日期）。工作结束后，用辐射计测量工作区域、防护服和手的辐射情况。使用经适当保护的运输容器。3、放射性废弃物区域········要经常从工作区域清除放射性废弃物。要正确记录放射性物质的使用和处理情况。要筛查超过剂量限度物质的剂量测定记录。要制订并经常性操练应急反应计划。应急反应中首先要帮助受伤人员。要彻底清洁受污染区域。如果可能，从安全办公室请求协助。310 书写并保存事故报告。97实验室生物安全手册98第七部分安全组织和培训99100第19章生物安全官员和安全委员会每个实验室都必须有完整的安全政策，安全手册，以及执行安全手册的支持程序。实验室的安全责任通常由研究所或实验室领导负责，部分责任也可委派给生物安全官员或其他适当人员。实验室安全也是所有管理者和实验室工作人员的职责，每个人都应对自己和同事的安全负责。要求工作人员能安全地进行工作，并向他们的主管报告所有的不安全行为、情况或事故。应由本单位或外单位人员定期进行安全审核。生物安全官员在可能的情况下应该任命一位生物安全官员，以确保整个实验室始终遵守生物安全制度和计划。由生物安全官员代表研究所或实验室的领导来执行这些职责。在小单位里，生物安全官员可能是微生物学家或一名专业人员，他们可能以兼职的形式来履行这些职责。不管其参与安全工作的程度如何，所任命的生物安全官员应该具有必要的专业能力，能够对某些符合适当的生物防护和生物安全程序的活动提出建议、进行检查并同意实施。310 生物安全官员应运用相关的国家和国际规章、规定和指南，此外还应能帮助实验室制定标准操作规范。指定的人员必须具备微生物学和生物化学，同时具备基础的物理学和生物科学的技术背景。实验室知识、临床实践知识和安全（包括防护设备）知识，以及与实验室设施的设计、操作和维护有关的工程原理方面的知识，对于生物安全官员都是极为必要的。生物安全官员还应能与行政、技术与后勤保障人员有效沟通。生物安全官员的工作应该包括以下各项：1、生物安全、生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。2、就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。3、与有关人员讨论违反生物安全方案或程序的情况。4、核实所有工作人员都接受了适当的生物安全培训。5、进行生物安全继续教育。6、对于所有牵涉到潜在感染性物质或有毒物品泄露等意外事故进行调查，并将调查结果以及处理意见向实验室主任和生物安全委员会报告。7、就可能的实验室感染与医务人员进行协调。8、在出现涉及感染性物质溢出或其他事故时，要确保清除了污染。9、确保废弃物的正确管理。10、确保对所有设备在修理或维护之前已经过适当的消毒处理。11、经常了解社区对卫生和环境问题的态度。310 12、要根据国家规定，针对病原体运入∕运出实验室制订适当的程序。13、对所有涉及感染性物质研究工作的计划、方案以及操作程序，均要在具体操作实施以前进行生物安全审查。310 14、组织应急系统。生物安全委员会应组成生物安全委员会来制订所在单位的生物安全政策和操作规范。研究方案涉及感染性因101实验室生物安全手册子、动物使用、重组DNA以及基因修饰物质时，生物安全委员会应进行审查。生物安全委员会的其他工作还包括危险度评估、制订新的安全政策以及仲裁安全事件纠纷。生物安全委员会的成员应能体现其组织及学科的专业范围。安全委员会的基本组成可包括：1、生物安全官员2、科学家3、医务人员4、兽医（如果进行动物试验）5、技术人员代表6、实验室管理人员代表。生物安全委员会需要听取不同部门和专家安全官员（例如在辐射防护、工业安全、防火等领域）的建议，并可能随时需要不同相关领域的独立专家、地方主管部门以及国家管理部门的帮助。310 在讨论特别有争议的或敏感性的研究方案时，社区成员的参与可能也是有帮助的。102第20章后勤保障人员的安全安全和最佳的实验室操作很大程度上取决于后勤保障人员，因此对后勤保障人员也有必要进行适当的安全培训。工程和建筑物的维护保养保养和维护结构、设施和仪器的熟练工程技术人员应了解实验室的工作性质以及安全规定和程序。对仪器设备进行维修保养后，某些项目的测试工作（例如生物安全柜在更换新过滤器之后的效果检查）应在生物安全官员的监督下进行。那些没有内部工程和维护保养人员的实验室或研究机构，应该与当地的维护人员建立良好的关系，使他们熟悉该实验室的仪器设备和工作。只有在经过清理之后，并在生物安全官员和∕或实验室主管的监督下，工程师和维修人员才可以进入三级生物安全水平或四级生物安全水平实验室。清洁（内务）保养三级生物安全水平和四级生物安全水平实验室应由实验室成员进行清洁。清洁人员只有在生物310 安全官员和∕或实验室主管的监督下才能进入三级生物安全水平和四级生物安全水平实验室进行310 保洁工作。103第21章培训规划不断进行岗位安全教育对于维持实验室工作人员和后勤保障人员的安全意识是很重要的。在生物安全官员和其他部门人员的协助下，实验室主管在人员的培训工作中发挥着重要的作用。生物安全培训（实际上即所有的安全和卫生培训）的效果取决于管理实施、激励性因素、充分的上岗培训、良好的沟通和最终的组织目标。下列各项是保证生物安全培训规划行之有效的必备要素：1、需求评估。这一过程包括确定相关的任务、重要性等级（以发生频率、危害程度以及复杂性来表示）以及完成这些任务的必要步骤等细节。2、确立培训目的。最令人满意的情况是，期望受培训者在进行培训之后，能在工作中加以应用。培训的目的是要了解开展实验的条件以及所需的熟练水平。3、规定培训的内容和方法。培训内容是受培训者为了实现实验操作目标所必须掌握的知识或技术。通常由那些对工作和相关要求最为了解的人员来确定生物安全培训规划的内容。其他的310 内容可能集中在练习如何解决工作中发生的问题，以及学习纠正那些人们在使用某一技术过程中所犯的错误。还不能确定某种教学方法（专题讲座、广播介绍、计算机辅助教学、交互式影像方式等）是否会比另一种更好，教学方法的好坏很大程度上取决于特定的培训需要、培训对象的构成等。4、考虑不同培训对象的差异。有效的培训一定要考虑培训对象的特点。不同人员在资质、读写、文化、口语以及培训前所掌握的技术水平等方面都可能不一致。关于培训规划能否提高受培训者的操作技能和个人安全水平，这可能取决于培训所采用的方法。对某些人应采用更直观的或“手把手”的方式更好；而其他人则以学习文字材料更有效果。工作人员如有特别要求时也应提出，例如对听力缺陷人员的课程调整。除了考虑这些因素外，建议制定安全培训规划的人员要熟悉了解成人教育的基本原则。5、针对不同的学习要求。教学内容（例如培训课程、录像带、文字材料等）不应该同所教授的技术或主题相冲突、相抵制或没有关联。例如，如果培训的目的是要提高解决问题的能力，那么在教育中就应该强调思维／推理而并非死记硬背，应该要求培养创造性的行为和／或相应的反馈（肯定／正确／可靠）能力。此外，提供与实际工作条件相似的实践机会有助于将技能应用到实际工作中。6、培训评估。培训评估有助于判断培训是否达到了预定效果。培训评估通常包括下列四种方式：····310 检查培训对象对所进行培训的反应考核培训对象对所培训内容的记忆和/或操作执行情况评估培训对象在工作中的行为变化按培训机构的目的或目标来考查是否已有明确的效果。对培训效果最完整的评估应包括全部上述四个方面。仅考虑培训对象对所进行培训的反应是一种最不有效的评估方法，因为这种反应与培训对象对培训内容的实际掌握程度之间可能没有关310 系，它也不应作为评估培训效果的唯一指标。1047、培训调整。由于衡量结果的标准多种多样，因此对培训效果的评估很难表明培训规划究竟是完全成功还是彻底失败。通常的结果为，培训对象与其他人相比，对课程内容的某些部分会有更好的理解、掌握和应用。培训所造成的知识或能力上的不同或差异，可能提示是否需要更长的培训时间、采用其他的培训方法或聘请更有能力的教师。WHO310 提供微生物安全培训的各种教具。105实验室生物安全手册106第八部分安全清单107实验室生物安全手册108第22章安全清单本安全清单用以协助对微生物实验室（生物医学实验室）的安全和安全保障状态进行评估。实验室建筑1、是否已经为设施的建设或建成后的评估考虑了试运行和认证指南？2、实验室建筑是否符合国家和地方的建筑要求（包括与自然灾害预防有关的必需要求）？3、实验室建筑总体是否整齐，并且周围没有障碍物？4、实验室建筑是否清洁？5、地板是否有任何结构性缺陷？6、地板和楼梯是否装修统一并能防滑？7、工作空间能否满足安全操作的需要？8、活动空间和走廊是否能够满足人员通行和大型仪器设备的搬移？9、实验台、家具和配件等能否正常使用？10、实验台表面能否耐溶剂和腐蚀性化学品的侵蚀？11、是否每个实验室房间都有洗手池？12、实验室建筑在构造和维护中能否避免啮齿动物和节肢动物进入及滞留？13、所有暴露在外的蒸汽管道和热水管道是否采取了隔热或防护来保护人员安全？14、是否配备有断电时使用的独立供电系统？15、是否只有授权人员方可进出实验室？310 16、是否已经进行了危险度评估来确保配备了相应的仪器设备和设施来进行所考虑的工作？储存设施1、是否安排了储存设施、储存架来确保储存物品不会滑动、倒塌或掉落？2、储存设施里是否堆积有易造成人员绊倒、火灾、爆炸和昆虫藏匿的垃圾、闲杂材料和物品？3、冰柜和储存区域是否上锁？环境卫生和工作人员设施1、建筑物是否处于清洁、有序和卫生的状态？2、是否有饮用水？3、是否分别给男女工作人员准备了清洁、足够大的卫生间和洗澡设施？4、是否提供冷热水、肥皂和毛巾？310 5、是否分别给男女工作人员提供了更衣间？109实验室生物安全手册6、实验室的每一位成员是否都配备了存放日常服装的设施（如带锁的橱柜）？7、是否有实验室成员进行午餐等活动的房间？8、噪声水平是否在可接受范围内？9、是否有适当的机构来收集和处理普通生活垃圾？暖气和通风1、工作温度是否舒适？2、对于直接暴露在日光下的窗户是否装有遮光窗帘？3、是否有足够的通风，例如每小时至少换气六次（尤其是有机械通风装置的房间内）？4、通风系统是否装有HEPA过滤器？5、机械通风系统是否会影响生物安全柜和通风橱内部及周围的气流？照明1、普通照明是否充分（例如300～400lx）？2、实验台上是否有工作（局部）照明？3、是否所有的区域都光线良好，房间和走廊是否有黑暗或光照不良的角落？4、日光灯是否与实验台平行？310 5、日光灯色彩是否和谐？保养1、每个实验室房间是否有足够的水槽和水、电、气的接口以保证工作的安全？2、对于保险丝、灯管、电缆、管道等是否有适当的检查和维护措施？3、故障是否可以在合理时间内排除？4、实验室的内部工程和维护保养是否由了解实验室工作性质的熟练工程师和技工来完成？5、工程和维护保养人员进出不同的实验室是否进行控制并需批准？6、如果没有实验室内部的工程和维护保养人员，是否已经联系了当地工程师和施工人员并让他们熟悉实验室仪器设备和工作？7、是否有清洁服务？8、清洁人员进出不同的实验室是否进行控制并需批准？9、是否有信息技术服务且有安全措施？实验室生物安全保障1、是否已经进行了定性的危险度评估来明确规定安全保障系统所保护的范围？2、是否已经明确规定了可接受的风险和影响范围的应对计划参数？3、在不用时，整个建筑物是否可以安全地锁上？4、门和窗是否是防破碎的？310 5、装有危害性物品以及贵重仪器设备的房间是否上锁？110第22章安全清单6、使用这样的房间、仪器和物品是否进行控制并需批准？防火与消防1、是否有火警系统？2、消防门是否完好？3、火灾监测系统是否运行正常并定期进行测试？4、火灾报警站是否可以使用？5、所有出口是否采用适当、明了的标志进行标示？6、不能直接看到的通向出口的通道是否有标志？7、建筑物内有人时，所有出口是否都没有被装饰品、家具和设备阻塞且没有上锁？8、是否安排了通向出口的通道，以便在紧急疏散时不必通过高危区域？9、所有的出口是否通向开阔地带？10、走廊、过道和活动区域是否清洁、畅通无阻，可供实验室成员通行及消防器材的搬移？11、所有消防器材是否采用适当颜色加以标识以便于查找？12、移动式灭火器是否已经满载并处于工作状态，并且始终位于指定地点？13、具有潜在火灾危险的实验室房间内是否装备了应急用的灭火器和／或灭火毯？14、如果在房间中使用易燃液体和气体，机械通风系统能否足以将易燃蒸气在达到危害浓度前有效排出？310 15、工作人员是否经过应对火灾紧急事件的培训？易燃液体的储存1、易燃液体的储存设施是否与主体建筑分开？2、有无火灾危险的明确标志？3、是否有独立于主体建筑物系统的自然通风或机械通风系统？4、照明开关是否装有密封盒或安装在室外？5、室内的照明器材是否密封起来以防止电火花点燃蒸气？6、易燃液体是否保存在采用不可燃性材料制成的适宜的通风容器中？7、所有容器的标签是否正确描述了所装的物品？8、在室外但靠近易燃液体储存的地方是否放置了适当的灭火器和／或灭火毯？9、在储存易燃液体建筑的内外是否有明显的“禁止吸烟”标示？10、在实验室房间内是否仅储存了最低量的易燃物品？11、是否采用结构合理的储存柜来储存易燃物品？12、这些储存柜是否有“易燃液体——防止火灾”的标示？310 13、工作人员是否经过正确使用和运输易燃液体的培训？压缩气体和液化气1、每个移动式气罐是否清楚标示了内容物的种类，并用正确的颜色进行了标识？111实验室生物安全手册2、压缩气体钢瓶及其高压阀和减压阀是否定期进行检查？3、减压阀是否定期进行维护？4、钢瓶在使用时是否连接减压装置？5、钢瓶在不用或运输时，是否装有保护帽？6、是否对所有压缩气体钢瓶进行了固定，以防止其倾倒，特别是在自然灾害时？7、钢瓶和液化石油气罐是否远离热源？8、工作人员是否经过正确使用和运输压缩气体和液化气的培训？电的危害1、是否按照国家电气安全规范来进行新电器的安装以及所有电器的更换、调整或维修？2、室内电路是否有接地导线（亦即采用三相线路系统）？3、实验室线路中是否安装了断路器和漏电保护器？4、所有电器设备是否得到了检测实验室的质量认可？5、所有仪器设备的连接软线是否在满足使用的条件下已经尽可能短，使用良好，没有磨损、毁坏及拼接？310 6、每个电源的插座是否仅供一台设备使用（没有使用适配器板）？个体防护1、实验室人员进行正常工作时，是否配备设计规范的防护服，如隔离衣、连体工作服、围裙、手套？2、在操作危害性化学品以及放射性和致癌性物质时，是否另外配备防护服？例如在处理化学品和溢出物时是否配备橡胶围裙和手套，在高压灭菌器和焚烧炉上卸载物品时是否戴隔热手套？3、是否配备安全眼镜、护目镜和防护罩（面具）？4、是否有洗眼装置？5、是否有应急淋浴设备（洗涤设施）？6、是否有符合国家和国际标准的辐射防护，包括辐射剂量测定仪？7、是否配备防毒面具，并定期清洁、清除污染、储存在清洁卫生的地方？8、是否为适当类型的防毒面具配置适宜的过滤器？例如针对微生物配置HEPA过滤器，针对气体或颗粒则配置相应的过滤器？9、防毒面具是否经试戴测试？工作人员的健康与安全1、是否有职业卫生服务机构？2、在重要地点是否放置急救箱？3、是否配备有资质的急救员？4、急救员是否经过处理实验室紧急事件的培训，包括接触腐蚀性化学品、意外食入有毒物310 品及感染性物质等情况？112第22章安全清单5、是否向内勤人员和办事员（domesticandclericalstaff）等非实验室工作人员说明了实验室及其所操作物品的潜在危害？6、是否在显著位置张贴了通告，清楚说明了急救员的地址以及急救服务的电话号码等信息？7、是否警告过育龄妇女操作某些微生物以及致癌、致突变和致畸物质可能造成的不良后果？8、是否告诉过育龄妇女，如果她们已经怀孕或可能怀孕时，应通知相关的医疗／科研人员，以便必要时为她们安排其他工作？9、是否有与实验室工作有关的免疫计划？10、是否为处理结核病材料或其他需要进行皮肤试验和／或辐射检查的实验室人员提供了该项检查？11、是否对疾病和事故进行正确记录？12、是否使用警告和预防事故的标志来尽可能减少工作危害？13、人员是否经过执行正确的生物安全操作的培训？14、是否鼓励实验室成员报告潜在的暴露事件？实验室仪器设备1、所有仪器设备是否都经过安全使用认证？2、在对仪器设备进行维护之前，是否进行了清除污染工作？3、生物安全柜和通风橱是否进行定期检测和保养？4、高压灭菌器和其他压力容器是否定期检查？310 5、离心机的离心桶及转子是否定期检查？6、是否定期更换HEPA过滤器？7、是否使用吸管来替代皮下注射用针头？8、破碎或有缺口的玻璃器皿是否总是丢弃而不重复使用？9、是否有盛放碎玻璃的安全容器？10、在可行时是否采用塑料来代替玻璃制品？11、是否配备并使用供丢弃锐器的容器？感染性物质1、能否在安全条件下收取标本？2、对送入实验室的物品是否进行登记？3、是否小心地在生物安全柜中打开标本以避免破损和渗漏？4、打开标本时是否戴手套及穿着防护服装？5、人员是否按现行的国家和∕或国际规定进行了感染性物质运输的培训？6、实验台是否保持清洁整齐？7、是否每天或更频繁地清除丢弃的感染性物质，并安全地进行处理？8、是否所有实验室成员都知道培养物和感染性物质破损或溢出时的处理程序？310 9、灭菌器的性能是否采用适当的化学、物理及生物学指示剂进行过检查？113实验室生物安全手册10、是否有定期清除离心机污染的程序？11、离心机是否使用密封的离心桶？12、是否使用了适当的消毒剂？消毒剂使用方法是否正确？13、在三级生物安全水平的防护实验室和四级生物安全水平的最高防护实验室中工作的人员，是否都经过了专门的培训？化学品和放射性物质1、不相容化学品在储存和操作中能否有效分开？2、所有化学品是否都贴上了正确名称和警告标签？3、是否在显著位置张贴有化学危害警告图？4、是否备有溢出物处理工具盒？5、是否对实验室成员进行溢出事故处理培训？6、易燃物质是否已经尽可能少量地、正确安全地储存在经认证的储存柜中？7、是否备有运输试剂瓶的工具？8、是否有辐射防护官员或适当的参考手册可供咨询？9、实验室成员是否经过安全操作放射性材料的适当培训？10、是否对放射性物质的储存和使用进行专门记录？11、是否配备放射线保护屏？310 12、是否监测工作人员辐射暴露情况？114第九部分参考文献、附录和索引115116参考文献1.2.Safetyinhealth-carelaboratories.Geneva,WorldHealthOrganization,1997,（http://whqlibdoc.who.int/hq/1997/WHO_LAB_97.1.pdf）.GarnerJS,HospitalInfectionControlPracticesAdvisoryCommittee.Guidelineforisolationprecautionsinhospitals.AmericanJournalofInfectionControl,1996,24:24-52,（http://www.cdc.gov/ncidod/hip/isolat/isolat.htm）.HuntGJ,TabachnickWJ.Handlingsmallarbovirusvectorssafelyduringbiosafetylevel3containment:Culicoidesvariipennissonorensis（Diptera:Ceratopogonidae）andexoticbluetongueviruses.JournalofMedicalEntomology,1996,33:271-277.NationalResearchCouncil.Occupationalhealthandsafetyinthecareanduseofresearchanimals.Washington,DC,NationalAcademyPress,1997.RichmondJY,QuimbyF.Considerationsforworkingsafelywithinfectiousdiseaseagentsinresearchanimals.In:ZakO,SandeMA,eds.Handbookofanimalmodelsofinfection.London,AcademicPress,1999:69-74.Biosafetyin310 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2252.1-1994）.117实验室生物安全手册15.Biologicalsafetycabinets-laminarflowbiologicalsafetycabinets（ClassII）forpersonnel,environmentandproductprotection.Sydney,StandardsAustraliaInternational,1994（StandardAS2252.2-1994）.16.StandardsAustralia/StandardsNewZealand.Biologicalsafetycabinets-installationanduse.Sydney,StandardsAustraliaInternational,2000（StandardAS/NZS2647:2000）.17.AdvisoryCommitteeonDangerousPathogens.Guidanceontheuse,testingandmaintenanceoflaboratoryandanimalflexiblefilmisolators.London,HealthandSafetyExecutive,1990.18.StandardsAustralia/StandardsNewZealand.Safetyinlaboratories-microbiologicalaspectsandcontainmentfacilities.Sydney,StandardsAustraliaInternational,2002（StandardAS/NZS2243.3:2002）.19.CentersforDiseaseControlandPrevention.RecommendationsforpreventionofHIVtransmissioninhealth-caresettings.MorbidityandMortalityWeeklyReport,1987,36（Suppl.2）:1S-18S.20.BosquePJetal.Prionsinskeletalmuscle.ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesof310 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LaboratoryCentreforDiseaseControl,HealthCanada,1998.39.SpringthorpeVS,SattarSA.Chemicaldisinfectionofvirus-contaminatedsurfaces.CRCCriticalReviewsinEnvironmentalControl,1990,20:169-229.40.Recommendationsonthetransportofdangerousgoods,13threvisededition,NewYorkandGeneva,UnitedNations,2003,（http://www.unece.org/trans/danger/publi/unrec/rev13/13files_e.html）.41.Technicalinstructionsforthesafetransportofdangerousgoodsbyair,2003-2004Edition.Montreal,InternationalCivilAviationOrganization,2002.42.EconomicCommissionforEuropeInlandTransportCommittee.RestructuredADRapplicableasfrom1January2003.NewYorkandGeneva,UnitedNations,2002,（http://www.unece.org/trans/danger/publi/adr/adr2003/ContentsE.html）.43.Infectioussubstancesshippingguidelines.Montreal,InternationalAirTransportAssociation,2003,（http://www.iata.org/ads/issg.htm）.44.TransportofInfectiousSubstances.Geneva,WorldHealthOrganization,310 （http://www.who.int/csr/resources/publications/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_9/en/）.2004,45.BergPetal.AsilomarconferenceonrecombinantDNAmolecules.Science,1975,188:991-994.46.EuropeanCouncil.CouncilDirective98/81/ECof26October1998amendingDirective90/219/EEConthecontaineduseofgeneticallymodifiedmicroorganisms.OfficialJournal,1998,L330:13-31.47.O’MalleyBWJretal.Limitationsofadenovirus-mediatedinterleukin-2genetherapyfororalcancer.Laryngoscope,1999,109:389-395.48.WorldHealthOrganization.Maintenanceanddistributionoftransgenicmicesusceptibletohumanviruses:memorandumfromaWHOmeeting.BulletinoftheWorldHealthOrganization,1993,71:497-502.49.FurrAK.CRChandbookoflaboratorysafety,5thed.BocaRaton,FL,CRCPress,2000.50.LengaRE.TheSigma-AldrichLibraryofChemicalSafetyData,2nded.Milwaukee,WI,AldrichChemicalCompany,310 1988.119实验室生物安全手册51.LewisRJ.Sax’sdangerouspropertiesofindustrialmaterials,10thed.Toronto,JohnWileyandSons,310 1999.120附录1急救急救是指在事故发生的时间和地点熟练运用医学处理原则。在被急救者得到医生的最终治疗以前，急救是处理意外事件的一种公认的方法。急救装备至少应包括一个急救箱，急救人员所需要的防护服和安全设施以及洗眼设备。急救箱急救箱从结构上应能防尘防湿。急救箱应置于显著位置并易于识别。根据国际惯例，急救箱用绿色背景下的白十字来加以标识。急救箱内应装有下列物品：1、一般性指南的说明书2、单独包装的不同尺寸无菌包扎敷料3、带有绷带的无菌眼垫4、三角绷带5、无菌创伤敷料6、安全别针7、可选择的无菌的非医用的创伤敷料8、权威性的急救手册，如国际红十字会出版的急救手册。参与急救人员的防护装备包括：1、用于口对口复苏术的接口管2、用于防止接触血液的手套和其他屏障性防护物品1，以及3、血液溢出处理的清洁盒（见手册的第14章）。310 应常备眼部清洗设备且训练工作人员能够正确使用。——————————1GarnerJS,HospitalInfectionControlPracticesAdvisoryCommittee.Guidelineforisolationprecautionsinhospitals.AmericanJournalofInfectionControl,1996,24:24–52,310 (http://www.cdc.gov/ncidod/hip/isolat/isolat.htm).121附录2工作人员的免疫接种应和每个研究人员充分讨论所操作的特殊微生物因子的危险。在开始操作这些微生物因子之前，应首先评估一旦发生暴露时可能的疫苗和∕或治疗药物（例如抗生素治疗）在当地的应用情况、注册情况和效用。有些工作人员可能在以前曾接种或感染过，因而已经获得免疫。如果特定的疫苗或类毒素已在当地注册并可以得到，那么在对可能的暴露已经作出危险度评估，并对个人作出临床健康评估以后，就应该提供使用。310 还应提供意外感染后用于临床处理的设备。122附录3WHO生物安全合作中心给下列任何地址写信均可以得到有关生物安全的训练课程、帮助和资料等方面的有用信息：zBiosafetyprogramme,DepartmentofCommunicableDiseaseSurveillanceandResponse,WorldHealthOrganization,20AvenueAppia,1211Geneva27,Switzerland（http://www.who.int/csr/）.WHOCollaboratingCentreforBiologicalSafety,SwedishInstituteforInfectiousDiseaseControl,NobelsVäg18,S-17182Solna,Sweden（http://www.smittskyddsinstitutet.se/English/english.htm）.zWHOCollaboratingCentreonBiosafetyTechnologyandConsultativeServices,OfficeofLaboratorySecurity,HealthCanada,100ColonnadeRoad,Loc.:6201A,Ottawa,Ontario,CanadaK1A0K9（http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl）.WHOCollaboratingCentreforAppliedBiosafetyProgrammesandTraining,OfficeofHealthandSafety,CentersforDiseaseControlandPrevention,1600CliftonRoad,MailstopF05,Atlanta,GA30333,USA310 （http://www.cdc.gov/）.WHOCollaboratingCentreforAppliedBiosafetyProgrammesandResearch,DivisionofOccupationalHealthandSafety,OfficeofResearchServices,NationalInstitutesofHealth,DepartmentofHealthandHumanServices,13/3K0413SouthDriveMSC5760,Bethesda,MD20892-5760,USA（http://www.nih.gov/）.WHOCollaboratingCentreforBiosafety,VictorianInfectiousDiseasesReferenceLaboratory,10WreckynSt,NthMelbourne,Victoria3051,Australia.Postaladdress:LockedBag815,POCarltonSth,Victoria3053,Australia310 （http://www.vidrl.org.au/）.zzzz123附录4设备的安全性仪器设备在使用时，有些操作可能造成微生物学危害，而另外一些操作或处理则是专门设计用来避免或减少生物学危害的（参见本手册第11章）。可能产生危害的仪器设备表A4-1列出了可能产生危害的仪器设备及其操作，并对消除或减少这些危害提出了建议。表A4-1仪器皮下注射针头危害意外接种、产生气溶胶或有害物质溢出[1]可能产生危害的仪器设备及其操作如何消除或减少危害·不要重新给针头戴护套或截断针头。·使用针头锁定型注射器以避免针头和注射器的分离，或使用针头和注射器为一体的一次性注射器。·采用规范的实验室技术，例如：——注射器抽液时要小心，尽可能减少形成气泡和接种物泡沫。——避免用注射器来混合感染性液体；否则，要确保针头的尖端伸入到容器中液面之下，并避免用力过大。——从有橡皮塞的瓶子中取下针头之前，应用经适当消毒剂浸湿的脱脂棉来包裹针头和塞子。——310 竖直向上将注射器中过量的液体和气泡排到经适当消毒剂浸湿的脱脂棉或装有棉花的小瓶中。·操作感染性物质时均应在生物安全柜中进行。·在对动物进行接种时要进行固定。在进行鼻腔或口腔接种时要使用钝的针头或插管。操作应在生物安全柜中进行。·使用后要进行高压灭菌并确保进行了妥善处理。如果使用的是一次性针头和注射器，只有在高压灭菌310 后才能拆卸。124附录4设备的安全性仪器离心机危害产生气溶胶、喷溅及离心管破裂如何消除或减少危害·使用可封闭性的容器（安全杯）或密封转子。在气溶胶沉降后（30min）再打开容器或转子，或在生物安全柜中操作。·在离心机和真空泵之间安装HEPA过滤器。·每个转子均有运转时间的记录，并应制订预防性维修保养措施以减少发生机械故障的风险。·在生物安全柜中装、卸容器或转子。超速离心机产生气溶胶、喷溅及离心管破裂厌氧罐爆炸、感染性物质扩散内爆、玻璃碎片和感染性物质扩散产生气溶胶、泄漏310 和容器破裂·确保催化剂周围电线盒的完整性。干燥器·置于坚固的金属丝笼中。匀浆器、组织研磨机·在生物安全柜中操作并打开仪器。·使用专门设计可以避免在转子轴承和O形垫圈处泄漏的仪器型号，或使用消化器。·在打开匀浆器以前先等候30min以使气溶胶沉积。冷却以使气溶胶凝聚。·如果使用手动组织研磨器，管外用可吸收材料包裹。超声处理器、超声波清洗仪产生气溶胶、听力损伤、皮肤炎·在生物安全柜或密封单元中操作并打开仪器。·确保隔离以免受分频谐波的伤害。·310 戴上手套以保护清洁剂对皮肤造成的化学危害。培养搅拌器、振荡器、搅拌器产生气溶胶、喷溅和泄漏·在生物安全柜或专门设计的一级屏障内操作。·使用结实的带螺口盖的培养瓶，必要时安装有过滤器保护的出口，并严格固定。·使用O形连接器来密封整个机器。·使用空气过滤器来保护真空管。·使用有效的清除污染的方法，例如化学法。·配备全金属脱水器和蒸汽冷凝器。·仔细检查所有玻璃真空管表面是否有擦痕。仅限使用专门设计用于真空作业的玻璃器具。冷冻干燥机（冻干机）产生气溶胶和直接接触污染材料水浴器微生物生长。叠氮化钠与有些金属形成爆炸性混合物。·确保定期清洁和消毒。·310 不用叠氮化钠作抑菌剂。125实验室生物安全手册除了微生物危害以外，还必须预测并预防与仪器设备相关的其他安全危害。表A4-2列出一些发生事故的原因。表A4-2事故仪器设备相关事故的原因事故原因减少或消除危害设计或建造有缺陷培养箱有电火花电击没有温度过高断路装置没有提供可靠的接地·符合国家标准不适当使用离心事故厌氧培养箱爆炸转轴上的离心桶吊篮没有平衡不正确使用气体··培训和监督工作人员310 培训和监督工作人员不正确配用家用保温瓶爆炸家用型冰箱爆炸液氮运输不当危险性化学品没有储存在防火∕防爆容器中，如用渗漏的螺旋瓶盖储存乙醚。维护过程中各组件的重新组装不正确。··使用专门设计的仪器设备低闪点溶剂和提取物仅贮存在具有火花∕爆炸保护装置的冰箱或安全柜中。310 培训和监督工作人员缺乏正确的维护火焰光度计产生的火焰·126附录5化学品：危害与预防本附录所列的是在卫生保健和研究实验室中经常遇到的化学品的基本的健康和安全信息、数据和适用的安全预防措施。没有列入本表格的化学品并不意味着没有危害。所有的实验室化学品310 应谨慎处理，尽量减少暴露。127表A5-1化学品：危害与预防（按化学品名称的汉语拼音排序）化学品2，4-二硝基苯肼C6H3(NO2)2-NHNH21-肼-2，4-二硝基苯2-羟基丙烷醇(CH3)2CHOH异丙醇物理特性橙红色结晶粉末；熔点：200oC；微溶于水。健康危害对皮肤和眼睛具有刺激性；经消化道摄食入、吸入和皮肤接触后引起损伤。火险安全预防保持潮湿润以减少爆炸的风险；佩戴防尘呼吸面罩，橡胶或塑料手套和化学级的护目镜。不相容的化学品可与氧化剂、还原剂起剧烈反应。其他危害带有乙醇气味的无色液体。熔点：-89C沸点：82oC与水混溶o刺激眼睛和呼吸道。作用于中枢神经系统，导致头疼、头晕、恶心、呕吐和昏迷。高度易燃。闪点：112C可燃范围：2.3～12.7%o容器严格密封并存放在远离火源的地方；在通310 风橱中使用；使用丁腈橡胶手套和眼保护罩。长时间接触空气和光时，可与氧化剂剧烈反应生成不稳定的过氧化物。用作喷雾消毒剂的70～85%异丙醇水溶液具有燃烧危险，不能用于在火源附近使用。o-联甲苯胺(C6H3-(3-CH3)(4-NH2))22HCl无色结晶。熔点：131℃沸点：200℃3,3’-二甲基略溶于水。（1,1’-二苯基）-4,4’-联铵二胺氨水带有刺激性气味的无色液体。气体：熔点：-78℃沸点：-33℃25%溶液：熔点：-58℃皮肤接触或食入会造成伤害；粉尘刺激呼吸道和眼睛。人的类可疑致癌物。易燃。燃烧释放刺激性或有毒烟雾（或气体）。避免接触；使用眼保护310 罩和手套。氧化剂。眼睛、呼吸系统和皮肤摄入后具有腐蚀作用。接触高浓度气体和蒸气可引起肺水肿。氨气的可燃范围：15～28%存储备容器须盖紧。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；在通风橱中操作，使用橡胶或塑料手套，佩戴化学级护目镜。与重金属（如汞和汞盐）剧烈反应生成爆炸310 性产物。128化学品物理特性沸点：38℃与水混溶。健康危害火险安全预防不相容的化学品其他危害苯C6H6带有特有芳香气味的无色挥发性液体。熔点：6℃沸点：80℃蒸气吸入后作用于中枢神经系统，导致眩晕和头疼，摄入高浓度苯会导致意识丧失和死亡；长期或慢性接触，可发生再生障碍性贫血、白血病、肝功能损害；能通过310 皮肤吸收。高铁血红蛋白血性紫绀发绀；对眼睛和皮肤有刺激作用。能经皮吸收。反复或长时间接触可能致敏。高度易燃。闪点：-11℃可燃范围：1.3～8%将容器放置在良好通风能和氧化剂（包括铬良好的地方，远离火源；酸、高锰酸钾和液态在合适通风良好的通风氧）剧烈反应。橱中使用；使用护眼罩和丁腈橡胶或聚氯乙烯手套。通过接地来防止产生静电。苯胺C6H5NH2具有类似芳香胺味的无色至棕色油状液体。熔点：-6℃沸点：185℃易燃。闪点：70℃爆炸限：1.2～11%储存于紧密密封严格密封的容器中，远离氧化剂。防止皮肤防止与皮肤和眼睛接触。使用局部排气通风设备或呼吸保护装置，使用防护手套、防护服和面310 罩。强氧化剂，强酸。苯酚C6H5OH带有特殊气味的无色或淡粉红色结晶熔点：41℃沸点：182℃溶于水。固体和蒸气对眼、皮肤和呼吸道具有腐蚀性，造成严重烧伤；经皮吸收；中枢神经系统紊乱，昏迷，肾脏、肝脏损伤。症状有：腹痛、呕吐、闪点：80℃可燃范围：1.7～6%引起火不要吸入蒸气；使用呼与氧化剂反应，吸面罩；避免皮肤避免灾和爆炸。与皮肤和眼接触；在通风柜中使用，使用丁腈橡胶手套、眼保护装置；如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨310 询；如果皮肤接触到，129化学品物理特性健康危害腹泻、皮肤刺激、眼睛疼痛；长时间接触稀溶液能引起皮炎。火险安全预防脱去所有的污染的衣服，用甘油、聚乙烯醇300或70%聚乙烯醇液体与30%甲基化乙醇的混合物擦洗污染区域，然后用水冲洗。不相容的化学品其他危害吡啶C5H5N带有特殊气味的无色液体。熔点：42℃沸点：115℃作用于中枢神经系统，导致头晕、头疼、310 恶心、气短、意识丧失。经皮吸收可引起红肿、灼烧感。消化道摄入消化道食入引起腹痛、腹泻、呕吐、虚弱。反复接触影响肝、肾功能。高度易燃。燃烧释放刺激性或有毒烟雾（气体）。蒸气∕混合物具有爆炸性。闪点：20℃爆炸限：1.8～12.4%通风、局部排风或使用呼吸保护装置，丁基或Viton手套和防护服。与强氧化剂和强酸剧烈反应。丙酮CH3COCH3带有甜味的无色挥发性液体。熔点：-95℃沸点：56℃易和水混合。对眼、鼻、喉有微弱的刺激。吸入后可能引起头310 昏、麻醉和昏迷。高度易燃。闪点：-18℃爆炸限：2.2～12.8%将容器放在通风良好的地方；远离火源；不能吸入蒸气，要使用呼吸保护装置以及眼保护罩。防止皮肤防止与皮肤和眼接触；在通风柜或良好通风情况下工作操作。在碱性条件下，和氧化剂（如盐酸和硝酸）、氯仿反应剧烈。不能和浓硫酸和浓硝酸的混合物共存。不能与氧化剂、酸、碱、氨、胺类共存。容易聚合，除非用对苯二酚进行抑制。长时间可能形成震动大型容器要接地以防静电。丙烯醛CH2=CHCHO带有特殊不愉快气味的无色或黄色液体。熔点：-87℃沸点：53℃引起流泪；严重呼吸道刺激症状。接触高浓度丙烯醛可引起肺水肿；反应可310 能会延后滞后发生。高度易燃。闪点：-26℃310 爆炸限：2.8～31%130化学品物理特性健康危害火险安全预防不相容的化学品敏感性的过氧化物。其他危害草酸HO2CCO2H无色结晶；溶于水熔点：190℃分解。皮肤接触或消化道摄入消化道食入会产生危害；粉尘刺激呼吸道和眼睛；溶液刺激眼睛，能造成皮肤烧伤。对眼和皮肤有腐蚀性；腐蚀消化道和呼吸道。吸入能引起肺水肿。反复接触能产生皮310 炎。易燃。燃烧时释放刺激性或有毒烟雾或气体。避免皮肤避免与皮肤和眼接触；使用眼保护罩和手套。氧化剂；银、汞和其他化合物。次氯酸溶液具有氯气味的无（含有10～色或淡黄色溶14%的有效氯）液；与水混溶。NaOCl强氧化剂。燃烧时产生有毒烟雾。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；如果皮肤接触到（即使是稀溶液），立即用水冲洗；不要吸入蒸气；在良好通风的地方使用；使用橡胶或塑料手套、化学级的眼保护装置。容器应密封良好严格密封；在通风橱中或机械排风系统中工作；使用防护服，包括：粉尘呼吸保护装置、化学级的护目镜和橡胶或塑料手套；使用手套和眼保护装置。与酸接触释放出剧毒的气体；与易燃物和还原性物质剧烈反应；与含氮化合物生成具有爆炸性的含氯化合物；310 可与甲醇剧烈反应。贮存过程中逐渐释放氯；用作消毒剂的稀溶液迅速变质；存放在远离酸的暗、冷并良好通风处。醋酸亚铊TlC2H3O2白色溶解性结晶熔点：110℃极易溶于水。消化道摄入消化道食入后可能由于累积作用而产生剧毒；影响神经和心血管系统；通过和眼、皮肤的接触造成危害。碘I2带有特殊气味的兰黑色鳞片状结晶。熔点：114℃对眼、呼吸系统和皮肤有刺激作用；反复暴露能引起皮肤过310 敏。不易燃，但有助于其他物质的燃烧。许多反应能引起火灾和爆炸。不要吸入蒸气。避免眼睛避免与眼睛接触；使用丁腈胶手套。与铝、钾和钠等金属以及乙醇和磷的混合物、310 乙炔和氨剧烈反应。131化学品物理特性沸点：184℃几乎不溶于水。健康危害可能会影响甲状腺。火险燃烧后释放刺激性或有毒的烟雾（或气体）。加热至高于熔点时，发生猛烈分解；加热时释放有毒烟雾。不能用水灭火。安全预防不相容的化学品其他危害叠氮化钠N3Na无色结晶性固体。熔点：300℃溶于水。消化道摄入消化道食入、吸入和皮肤接触产生剧毒；能引起烧伤。粉尘和溶液刺激眼睛和皮肤；经皮吸收。310 可以经皮吸收，能引起膀胱癌；应避免一切接触。如果皮肤接触到，立即用水冲洗；不要吸入粉尘；使用橡胶或塑料手套，佩戴眼保护罩。与溴、二硫化碳或铬酰氯发生爆炸性反应；固体与包括铜、铅及汞的重金属反应生成爆炸性的金属叠氮化盐；与酸接触产生剧毒和爆炸性的气体。许多国家禁止或控制使用。对二氨基联苯1,1’-二苯基-4,4’-联胺明黄色粉末。熔点：128℃沸点：400℃微溶于水，极易溶于酸和有机溶剂。易燃，燃烧产生有毒烟气（气体）。避免一切接触；使用眼和皮肤保护装置；在有排气通风装置的通风橱中使用。二噁烷C4H8O2二乙烯化二氧1,4-二氧杂环310 己烷带有特殊气味的无色液体熔点：12℃沸点：101℃对眼和呼吸道有刺激作用，能影响中枢神经系统，导致头疼、恶心、咳嗽、咽喉疼、腹痛、头昏、嗜睡、呕吐、意识丧失；能经皮吸收。肝、肾功能损伤，为可疑致癌物。高度易燃。使用通风、局部排风装远离可能的火源。置。流动、搅动时等生不能有明火、火花，不能抽烟；不能和强氧化成静电。剂或热的表面接触，不能使用压缩空气来装卸和处理，应使用不产生火花的工具。使用防护手套和防护服、面罩或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护能与强氧化剂、浓的强酸剧烈反应生成具有爆炸性的过氧化物。与某些催化剂能发生爆炸性的反应。310 侵蚀多种塑料。132化学品物理特性健康危害火险装置。安全预防不相容的化学品其他危害二甲胺(CH3)2NH带有刺激性气味的无色挥发性液化气体；熔点：-93℃沸点：7℃与水混溶。具有芳香味的无色液体。熔点：-95～-13℃沸点：136～145℃不溶与水。具有310 特殊气味的无色液体。熔点：-73℃沸点：87℃对眼和呼吸系统有严重刺激性。吸入可引起肺水肿。快速蒸发可导致冻伤。溶液对眼和皮肤具有腐蚀性。极易燃。闪点：-26℃可燃限：2.8～14%溶液高度易燃。闪点：-18℃远离火源；如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；在通风橱中使用；使用丁腈橡胶手套和化学级的护目镜。避免眼接触；使用丁腈橡胶手套和眼保护罩；容器应严格密封；远离火源存放。使用通风设备、局部排风或呼吸保护；使用聚乙烯醇、Viton或涂银手套，安全眼镜，或同时具备眼和呼吸保护的装置。能与氧化剂、汞起反应。二甲苯（混合异构体）C6H4(CH3)2二甲基苯三氯乙烯CHClCCl2易燃液体。能影响中枢神经系统，导致头疼、头昏、闪点：27～32℃特殊条件下可燃。疲劳，恶心。310 液体和蒸气刺激眼、皮肤、黏膜和呼吸道；消化道食入有害；长期皮肤接触能使皮肤受损。非特异的神经系统损伤。接触后能加重噪声引起的听力损伤。动物实验提示具有人生殖或发育毒性。对眼、皮肤具有刺激作用；长期暴露能引起皮炎和影响中枢神经系统，导致记忆力丧失；能影响肝肾，是一种人的可疑致癌物。接触热表面或火焰时，可能含有杂质乙苯。乙苯是一种分解生成有毒和腐蚀性的气体（光气、氯化可疑致癌剂。氢；接触强碱时分解生成二氯乙烯；与金属粉末（如镁、钛和钡）剧烈反应；潮湿情况下见310 光缓慢分解生成盐酸。133化学品二氧化氯ClO2物理特性黄至红色气体或红棕色液体。熔点：-59℃沸点：10℃健康危害对眼、皮肤和呼吸道具有严重刺激性。吸入气体可引起肺水肿。反应可能延后滞后。需要医学观察。火险不易燃，但有助于其他物质燃烧。加热、光照、受到震动或接触火花能引起爆炸。安全预防在具有通风设备的密闭系统中使用；使用防护手套和防护服、安全护目镜或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。使用隔温手套；只能存放在开口容器中，放置在通风的房间或地方。不相容的化学品强氧化剂。与易燃的还原性材料激烈反应。与磷、氢氧化钾、硫、氨、甲烷、磷化氢和硫化氢310 反应剧烈。其他危害二氧化碳（固体，“干冰”）CO2高氯酸HClO4-79℃时为半透明的白色固体；环境温度下升华成气体。无色液体；与水混溶。在狭窄或通风不好的地方有窒息的危险；接触“干冰”会引起冻伤。强氧化剂。具有腐蚀性，引起严重的眼和皮肤烧伤；不易燃，但有助于如果消化道摄入消化其他物质的燃烧。道食入，具有腐蚀性；蒸气腐蚀眼、皮肤和呼吸道。吸入蒸气能引起肺水肿。碱金属，强碱。避免吸入蒸气和其他途径的接触；穿防护服，包括丁腈胶手套、眼睛和面部保护装置；使用热溶液时，须在通风橱中进行。易燃物和还原剂：醋酐、铋及其合金、乙醇、金属、纸张、木材和其310 他有机材料。强氧化剂，与许多无机物和有机物接触可以形成爆炸性产物；可污染木制地板、实验台等物品。后，敲打后冲击可能发生爆炸。高锰酸钾KMnO4紫色结晶。熔点：240℃（分解）易溶于水吞咽或吸入粉尘具有腐蚀性；对眼睛和呼吸道具有极度的刺激性；吸入粉尘可引起肺水肿。对眼、皮肤和呼吸道具有刺激作用。皮肤反复和长时间接触能强氧化剂；能点燃易燃材料。使用防护服、眼保护罩，和多种无机和有机化如果产生粉尘，要使用合物或金属粉末混合防颗粒呼吸罩。发生剧烈反应或爆炸。铬酸CrO3六价铬氧化物暗红色无嗅的薄片或粉末，经常310 使用其水溶液。250℃以上分解生成三价氧化铬和氧气，增加火险。防止皮肤防止与皮肤和眼接触。避免吸入细小的粉尘和薄雾。在水溶液中是能与碱反应的强酸，具有腐蚀310 性。强氧化剂，与可燃134化学品物理特性熔点：197℃健康危害引起皮炎和铬溃疡、皮肤过敏。吸入能引起哮喘样反应。可能造成鼻中隔穿孔。人致癌物人类致癌物。火险许多反应能产生可能导致危害。安全预防使用通风、局部排风或呼吸保护装置。不相容的化学品材料、有机物或其他易氧化材料（纸、木头、硫、铝、塑料等）起反应。对金属有腐蚀性。其他危害汞Hg（水银）比重大的的银色液体。熔点：-39℃沸点：357℃310 不溶于水。能通过皮肤吸收。反复暴露能引起肾脏、中枢神经系统紊乱，导致呕吐、腹泻、头疼、恶心、齿龈肿胀、牙齿脱落。不易燃，燃烧后释放刺激性或有毒烟雾。装汞的容器应关闭紧密；在通风橱或通风良好的地方使用；防止溢出；遵守严格的卫生措施；使用丁基、丁腈合成橡胶手套。不能与乙炔、雷酸共存。能与氨、叠氮化物、环氧乙烷反应生成爆炸性产物；与溴猛烈反应；与多种金属形成汞齐。在能容纳溢出液的存水盘上存放容器或进行操作；用一个毛细管连接的小吸气瓶通过泵来吸走溢出液体；用锌粉来处理溢出区域以形成汞齐。能分解放出氧，导致容器内压力上升。贮存在暗、冷处；不得使用金属（如黄铜、铜、铁）310 容器和仪器。过氧化氢H2O2无色液体熔点：-39℃（70%）沸点：125℃（70%）与水混溶，能配制成不同浓度的水溶液。高浓度（60%）的过氧化氢具有腐蚀性。皮肤长时间接触低浓度（6%）过氧化氢也会有受到腐蚀性；稀溶液对眼、呼吸系统和皮肤有刺激作用。氧化剂；与易燃材料接触能引起火灾。如果皮肤接触到，立即用大量的水冲洗；如果接触浓度超过20%的溶液，须使用丁腈胶手套和眼保护罩。与多种化学试剂（包括氧化剂、碱）起剧烈反应；侵蚀大部分金属及其盐、易燃液体以及其他易燃材料（纸张、纺织品）、苯胺和硝基甲烷。甲苯C7H8甲基苯带有特殊气味的无色液体。熔点：-95℃沸点：111℃310 是中枢神经系统镇静剂，对眼、黏膜和皮肤具有刺激作用。反复接触能引起人生高度易燃。蒸气可能闪光。闪点：4℃C可燃范围：1.4～容器应密封良好严格密封；远离火源贮存；容器接地以防止静电；不要吸入蒸气；使用呼吸保护装置；在通风橱或能与氧化剂反应。310 强酸、碱和氧化剂。135化学品物理特性不能与水混合。健康危害殖、发育毒性。7%火险灭火材料：小火：使用干燥化学品、二氧化碳、泡沫、水雾或惰性气体（氮气）。安全预防通风良好的地方使用。使用丁腈橡胶手套。不相容的化学品其他危害甲醇CH3OH带有特殊气味的无色挥发性液体。熔点：-98℃沸点：65℃与水混溶。影响中枢神经系统，导致意识丧失、黏膜刺激。视网膜和视神经慢性损伤。长期皮肤接触能引起皮炎。310 能经皮吸收。对眼和皮肤具有强烈的刺激作用；对呼吸道有刺激作用；长时间暴露于甲醛蒸气能出现哮喘样症状：结膜炎、咽喉炎或支气管肺炎；皮肤接触后可引起皮肤过敏；可能产生不可恢复的健康问题；为可疑致癌物。消化道摄入消化道食入、吸入和皮肤接触可造成损伤；可刺激高易燃性。闪点：-16℃可燃限：7～37%储存容器紧密密封严格密封，远离火源存放；避免吸入蒸气和皮肤接触；在通风橱或通风良好的地方使用；使用橡胶或塑料手套以及眼保护装置。穿防护服（如塑料围裙、橡胶或塑料手套和化学级护目镜）；在通风橱或良好通风情况下使用。能与氧化剂剧烈反应；与镁或溴反应剧烈，与强氧化剂、氯仿和钠的反应能发生爆炸。甲醛溶液：（37～41%甲醛，含有11～14%甲醇）HCHO具有刺激性气味的无色液体。310 熔点：96℃与水混溶。闪点：50℃能与氧化剂、硝基甲烷激烈反应生成爆炸性产物，与盐酸反应生成强致癌物——二氯甲醚。浓的甲醛溶液在低于21℃贮存时会变浑浊，故应于21～25℃保存；稀溶液（1～5%）和中等浓度溶液（5～25%）仍存在浓溶液的许多危害。金胺4,4’-碳亚胺-二（N,N-二甲苯黄色薄片或粉末；不溶于水。熔点：136℃避免皮肤接触和粉尘吸入；戴橡胶或塑料的化310 学级手套。在通风橱中强氧化剂。136化学品胺）苦味酸C6H2(NO2)3OH2,4,6-三硝基苯酚物理特性健康危害眼睛和皮肤；为可疑致癌物。火险安全预防使用或佩戴防尘口罩。不相容的化学品其他危害会被带水润的湿状的黄色结晶或溶于乙醇的黄色结晶。熔点：122℃微溶于水。经消化道摄入消化道食入、吸入或皮肤接触后有毒性。摄入后引起头疼、恶心；刺310 激眼睛。干燥时爆炸。始终用水保持湿润或仅使用在乙醇溶液中使用。黄色皮肤斑点。与多种金属形成比酸本身更具爆炸性的盐；与混凝土接触可形成磨擦敏感、具爆炸性的苦味酸钙；能和还原剂激烈反应。磷酸H3PO4无色黏绸稠液体或吸湿性白色结晶。熔点：42℃在低于沸点213℃时分解。溶于水。具有腐蚀性；引起皮肤和眼睛烧伤。侵蚀多种金属，产生氢气；火焰加热时释放出有毒烟雾。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；使用丁腈橡胶手套和眼保护装置。硫化氢H2S带有强烈臭鸡蛋味的无色气体；熔点：-85℃沸点：-60310 ℃极易燃烧。能影响中枢神经系统，导致头疼、头昏、爆炸限：4.3～46%咳嗽、咽喉痛、恶心、呼吸困难、意识丧失和死亡；吸入能引起肺水肿。能引起眼睛红肿、疼痛、深度烧伤。使用通风设备，局部排风或呼吸保护装置，安全护目镜或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。不能与强氧化剂和浓硝酸共存。气体持续作用下会迅速造成嗅觉侵蚀多种金属和塑料。疲劳，从而不能引起警觉。硫酸H2SO4无色、无味的黏稠液体；与水混溶。浓度为15%的浓硫酸具有腐蚀性，可引起严重烧伤；吸入雾滴310 和蒸气具有强腐蚀燃烧产生有毒烟雾。不易燃。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；如果皮肤接触到（即使是稀溶液），立即用水是一种强氧化性的干如果将浓酸加入燥剂，与有机氮氧化到水中会引起局物、高锰酸钾、碱金属部爆暴沸。310 及高氯酸盐剧烈反应。137化学品物理特性熔点：10℃沸点（分解）：340℃。健康危害性；稀溶液刺激眼睛和皮肤；能引起烧伤和皮炎。火险许多反应能引起燃烧和爆炸。用水稀释产生热量，造成液滴飞溅或暴沸。总是将酸加入水中，不能将水加入酸中。安全预防冲洗；脱去污染的防护服；使用丁腈胶手套、眼和面部保护装置。不要接触易燃物质。不相容的化学品与易燃材料、氧化剂、胺类、碱、水和大部分金属不相容，不能过度加热。其他危害氯气310 Cl2带有刺激性气味的黄绿色气体。熔点：-101℃沸点：-34℃对眼、皮肤和呼吸道有腐蚀作用。吸入气体能引起肺炎和肺水肿，并导致反应性气道病综合征（RADS）。液体的快速蒸发可导致冻伤。高浓度暴露可导致死亡。可能有延后滞后发生的作用；需要医学观察。不易燃，但有助于其他物质燃烧。使用呼吸保护装置、密闭系统和通风系统；使用隔温手套、防护服、安全护目镜或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。水溶液为强酸，与碱和许多有机物（乙炔、丁二烯、苯和其他石油成分、氨、氢、碳化钠、松节油）以及金属细粉剧烈反应，引起火灾和爆炸。在有水存在时水的条件下可侵蚀许多金属。可侵蚀塑料、橡胶和310 涂料。萘胺（α和β）带有特殊气味的白色至粉色结晶C10H9NN-苯基-α-萘胺和N-苯基-β-萘胺吸入、消化道摄入消化道食入易燃。α-萘胺的熔点：和皮肤接触α和β萘50℃胺毒性都很强；为引萘胺，的沸点：起膀胱癌的致癌物；301℃实验证实为致突变、避免一切接触。使用合适的防护服；使用通风橱和排气通风装置。在许多国家禁止310 或需依法使用。138化学品物理特性β-萘胺的熔点：113℃，β萘胺的沸点：306℃略溶于水，而其氢氧化物溶于水。健康危害致畸物。经皮吸收。火险安全预防不相容的化学品其他危害氢氧化钾KOH白色薄片、粉末、腐蚀呼吸道、眼睛和小丸或柱状物皮肤；吸入粉尘导致肺水肿。熔点：360℃沸点：1320℃极易溶于水。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；310 如果皮肤接触到（即使是稀溶液），立即脱去污染的衣服，戴上橡胶或塑料手套和眼保护罩。不易燃。接触湿气或水能产生大量的热，足以点燃易燃物。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；如果皮肤接触到（即使是稀溶液），立即用水冲洗，脱去污染的工作服，使用橡胶或塑料手套，佩戴眼保护装置。与酸、硝基苯及许多其在存在水的条件他洗涤剂起剧烈反应；下可侵蚀许多金属（铝、锌、锡）。与水混合时释放大量的热；储存在良好密封的容器中。氢氧化钠NaOH无色的薄片、粉末、小丸和柱状物熔点：318℃沸点：1390℃溶于水。固体和浓度为5%的浓溶液具有腐蚀性，能引起眼和皮肤烧伤；吸入粉尘引起呼吸道损伤、肺水肿；消化道摄入消化道食入具有腐蚀性；稀溶液刺激眼；如果眼睛长期310 接触，可能引起严重损伤。消化道摄入消化道食入、吸入和皮肤接触有剧毒。对眼睛有严重的刺激作用。与水反应释放大量的用良好密封的容热；与氯仿-甲醇混合器盛放贮存在干物以及强酸剧烈反应。燥处。氰化钠NaCN带有杏仁味的白色结晶性粉末。熔点：563℃沸点：1496℃燃烧时可产生有毒烟雾。不要吸入粉尘，使用呼吸保护装置；避免眼镜和皮肤接触；使用橡胶或塑料手套，佩戴眼保与酸或与溶解二氧化碳的水释放剧毒的氢氰酸（HCN）气体；与亚硝酸盐形成爆炸性用漂白粉（次氯酸钠）来处理溢出液并使之作用24310 小时；小心清139化学品物理特性极易溶于水。健康危害可经皮吸收。反复暴露能影响甲状腺。火险安全预防护罩。脱去污染的防护服；佩戴化学级的护目镜、橡胶或塑料手套；放置在安全上锁及通风的储藏室。不相容的化学品的混合物。其他危害理溢出固体至加有漂白粉的水中；在丢弃前使之作用24小时h；实验室内要备有氰化物解毒剂。三氯甲烷CHCl3带有特殊气味的无色挥发性液体。熔点：-63℃沸点：61℃微溶于水。吸入、消化道摄入消化道食入和皮肤接触310 可造成伤害；刺激眼睛和皮肤；能影响肝、肾和中枢神经系统，导致头疼、恶心、轻微黄疸、食欲不振、昏迷；长期和慢性暴露能引起动物致癌。是可疑的人致癌物人类致癌物。具有腐蚀性；引起眼、不易燃。皮肤和呼吸道严重烧燃烧后可产生有伤。毒烟雾。穿防护服，使用丁腈橡胶手套和眼保护装置；在通风橱中使用。强碱；某些金属（如铝、加热降解时形成镁、锌）粉末；强氧化光气。剂。可侵蚀塑料、橡胶。三氯乙酸CCl3COOH带有刺激性气味的白色潮解性结晶。熔点：58℃沸点：197.5℃溶于水、乙醇和乙醚。避免眼睛避免与眼睛、皮肤接触。使用橡胶或塑料手套和化学级的护目镜和面罩、呼吸保护装置；如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询。与铜/二甲基亚砜混合物以及在与碱、强氧化310 剂、金属（如铁、锌和铝）接触时会发生剧烈反应。存放于干处。浓水溶液会剧烈310 分解。140化学品三氯乙烯CHClCCl2物理特性具有特殊气味的无色液体。熔点：-73℃沸点：87℃健康危害对眼、皮肤具有刺激作用；长期暴露能引起皮炎和影响中枢神经系统，导致记忆力丧失；能影响肝肾，是一种人类可疑致癌物。能通过皮肤吸收，长接触时间能引起皮炎；对眼睛有刺激作用，能引起肝、肾损伤，中枢神经系统紊乱；头疼、恶心、轻微黄疸；食欲不振、昏迷；是一个一种动物致癌物。火险特殊条件下可燃。安全预防使用通风设备、局部排风或呼吸保护；使用聚乙烯醇、Viton或涂银手套，安全眼镜，或兼具呼吸保护作用的眼保护装置。不相容的化学品接触热表面或火焰时，分解生成有毒和腐蚀性的气体（光气、氯化氢；接触强碱时分解生310 成二氯乙烯；与金属粉末（如镁、钛和钡）剧烈反应；潮湿情况下见光缓慢分解生成盐酸。接触热表面或火焰时，分解形成有毒的具有腐蚀性的烟雾或气体（氯化氢，氯气和光气）。与某些金属（如铝、镁和锌）反应。其他危害四氯化碳CCl4带有特征性醚类气味的无色液体。熔点：-23℃沸点：76.5℃不易燃，在燃烧时释放刺激性的或有毒烟气或气体。避免一切接触；使用通风、局部排风或呼吸保护装置；使用丁腈橡胶或Viton手套和防护服，面罩或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。使用通风、局部排风，或使用呼吸保护、防护手套、安全眼镜。四氢呋喃C4H8O二乙烯化氧310 四亚甲基化氧有特殊气味的无色液体。熔点：-108.5℃沸点：66℃中枢神经系统镇静高度易燃。能形成剂，引起昏迷以及眼、爆炸性过氧化物。皮肤和呼吸道的刺闪点：-14℃激。涉及四氢呋喃的火灾用水灭火无效，但可以用水于冷却被火灾中烤热的的容器。与强氧化剂、强碱、以及一些金属卤化物剧烈反应，发生燃烧和爆炸。侵蚀某些塑料、橡胶和涂料。四氢呋喃在阳离子引发剂作用下聚合。与氢310 氧化钙回流发生爆炸。四氧化锇带有刺激性气味吸入、消化道摄入消强氧化剂。不易容器严格密封后存放在141化学品OsO4物理特性的淡黄色结晶。熔点：40℃沸点：130℃低于沸点时升华溶于水。健康危害化道食入和皮肤接触毒性很强，导致严重烧伤和刺激；蒸气、固体及溶液对皮肤具有腐蚀性；吸入会引起肺水肿。火险燃，但有助于其他物质的燃烧。安全预防通风良好的地方；在通风橱中使用固体和溶液；使用化学级的护目镜和防护手套；溶液的配置方法：将没有开封的装有试剂的安培瓶瓿放入一定量体积的水中，加塞、振摇使安培瓶破裂。使用局部排风或呼吸保护装置，防护手套和护310 目镜。不相容的化学品其他危害铜Cu微红色、有光泽和延展性可煅性的无嗅固体。暴露在潮湿空气中，红色粉末可变为绿色。熔点：1083℃沸点：2567℃吸入铜的烟雾能引起金属烟热病。易燃。与乙炔化合物、环氧乙烷、叠氮化物和过氧化氢可形成对振动敏感的化合物。与强氧化剂（如氯酸盐、溴酸盐和碘酸盐）反应产生爆炸危险情。五氧化二磷P2O5吸湿性白色结晶或粉末熔点：340℃升华点：360℃对眼、皮肤和呼吸道有刺激作用，主要症状有咽喉痛、咳嗽、灼烧感、气短、皮肤烧伤、疼痛、水泡、310 眼睛灼烧。吸入能导致肺水肿。摄入能引起腹绞痛、灼烧感、腹泻、咽喉痛、呕吐。不易燃，但有助于其他物质的燃烧。有很多反应能引发火灾和爆炸，燃烧释放刺激性或有毒烟雾（或气体）。局部排风或呼吸保护；防护手套和防护服，面罩或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。水溶液是一种强酸；与碱剧烈反应；具有腐蚀性。与高氯酸激烈反应，引起燃烧和爆炸；与水反应激烈，形成磷酸。在水存在的情况下，侵310 蚀多种金属。戊二醛带有刺激性气味对眼和上呼吸道有强在通风橱或通风良好的能与强氧化剂剧烈反通常制成不同浓142化学品OHC(CH2)3CHO物理特性的无色或淡黄色液体。熔点：-14℃沸点：189℃与水混溶健康危害烈刺激性；长时间吸入或皮肤接触能致敏。火险安全预防情况下使用。使用橡胶或塑料手套，佩戴眼保护罩。不相容的化学品应。其他危害度的水溶液。浓溶液加入稳定剂来加强其稳定性。硒Se各种形式的无嗅固体，深红棕色至蓝黑色的无定形固体，或红色透明结晶，或金属灰至黑色结晶。310 熔点：170～217℃沸点：685℃对皮肤和眼具有刺激作用；吸入粉尘可引起肺水肿。反复接触能导致指甲脱落和胃肠效应。易燃。燃烧释放刺激性或有毒烟雾（或气体）。防止粉尘扩散；遵守严格的卫生措施；使用局部排风、防护手套、防护服和安全眼镜。与氧化剂和强酸剧烈反应。50℃与水反应形成易燃的氢气和亚硒酸。温和加热情况下，与磷和金属（如镍、锌、钠、钾、铂）起白炽光反应。细胞松弛素（A～J）白色粉末熔点：可变化摄入、吸入或通过皮肤吸收引起中毒；能引起先天性的胎儿畸形。紫绀发绀症状的高铁血红蛋白血症，肝脏损伤。症状包括：蓝唇或蓝指甲、蓝皮肤、头晕、恶心、虚弱、意识丧失。经皮吸收。易燃。闪点：88℃310 存在火和爆炸危险避免眼睛避免与眼睛、皮肤和衣服接触；使用化学级的护目镜和橡胶或塑料手套。通风，局部排风或呼吸保护装置，防护手套，防护服，安全护目镜。强氧化剂。硝基苯C6H5NO2带有特殊气味的淡黄色油性液体。熔点：6℃沸点：211℃燃烧产生包括氮氧化物的腐蚀性烟雾。能与强氧化剂和还原剂剧烈反应，带来着火和爆炸的危险。侵蚀多种塑料。与多种有机和无机化合物形成爆炸性的（热不稳定310 的）物质或混合物。143化学品硝酸（50～70%）HNO3物理特性无色或淡黄色冒烟液体。熔点：-42℃沸点：83～121℃能与水混溶。健康危害具有腐蚀性。对眼和皮肤能引起严重的灼烧。吸入蒸气能导致肺水肿。火险氧化剂；与易燃材料接触能发生火灾。燃烧释放有毒的烟雾。安全预防不要吸入蒸气；使用呼吸保护面罩；如果眼睛接触到，立即用水冲洗和进行医疗处理；如果皮肤接触到，立即用水冲洗，脱去污染了的防护服；使用聚氯乙烯手套、塑料围裙和化学级的护目镜；在通风橱中使用。防止粉尘扩散；遵守严格的卫生措施；使用橡胶或塑料手套、面罩以及同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨310 询。不相容的化学品其他危害乙酸、铬酸、氢氰酸、与其他化学试剂苯胺、碳、硫化物、碱、相比，浓硝酸会金属和其他多种物质。发生更危险的反应。硝酸银AgNO3白色结晶。熔点：212℃沸点：444℃溶于水。严重刺激性，可引起眼和皮肤烧伤；消化道摄入消化道食入具有腐蚀性；长期或反复接触引起皮肤出现灰蓝色斑点（银中毒）。不易燃，但有助于其他物质的燃烧。在碱或葡萄糖存在下，氨溶液能沉淀产生具有爆炸性的氮化银。与乙醇生成爆炸性产物；与丙烯腈能发生爆炸性聚合反应；与木碳、镁、磷和硫混合，导致着火爆炸。强氧化剂，与易燃的还原性材料激烈反应。会侵蚀某些形式的塑料、橡胶和与氨水、氧化剂、金属、涂料。有机化合物和磷激烈310 反应。溴Br2带有刺激性气味的深红棕色烟状液体。熔点：-7.2℃沸点：58.8℃具有腐蚀性。蒸气对眼睛和呼吸道有刺激作用，吸入可引起肺水肿和并影响中枢神经系统。与眼睛接触后，能引起视力模糊、红肿、疼痛和严重的组织烧伤。不易燃，但有助于其他物质的燃烧。许多反应可以引起火灾和爆炸。加热将引起具有燃烧危险的压力升高。在具有通风设备的密闭系统中使用。使用防护手套和工作服、安全护目镜、面罩或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保310 护装置。144化学品溴化氰BrCN物理特性带有刺激性气味的无色或白色结晶。熔点：52℃沸点：61℃健康危害对眼、皮肤和呼吸道具有严重刺激作用。吸入蒸气能引起延发性的肺水肿，从而。能影响细胞的呼吸，导致惊厥、意识丧失、呼吸衰竭和死亡。火险不易燃，但加热后生成可燃性气体。燃烧后，产生刺激性或有毒烟雾或气体。安全预防在具有通风设备的密闭系统中使用。使用防护手套和防护服、安全护目镜、面罩或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。不相容的化学品在加热以及与酸接触时会分解，产生剧毒和易、易燃的氰化氢和腐蚀性的溴化氢。能与强氧化剂反应。缓慢地和与水和湿气反应产生氰溴酸和氢氰酸。在有水存在时能下，侵310 蚀许多金属。其他危害亚碲酸钾K2TeO3白色潮解性结晶。极易溶于水。经消化道摄入消化道食入和吸入粉尘均有毒性；刺激皮肤和眼睛。穿防护服。亚硒酸氢钠NaHSeO3无色、白色结晶消化道摄入消化道食性粉末；溶于水。入和吸入粉尘有毒；累积效应造成潜在危害；实验证实为致畸剂；长期皮肤接触可引起皮炎。带有刺激性气味的无色烟雾状液体；与水混溶。沸点：-121℃对眼睛、呼吸系统和皮肤具有腐蚀性，反复吸入蒸气可能引起310 慢性支气管炎症。穿防护服。氧化剂。盐酸（10～37%HCl）氯化氢不要吸入烟雾；使用呼吸保护面罩；如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；如果皮肤接触到，立即用大量的水冲洗；在通风橱中使用；使用橡胶或塑料手套和眼保护装置与碱（固体或浓溶液）燃烧释放强毒性发生剧烈反应，与固体烟雾。高锰酸钾可发生爆炸；与许多金属接触产生毒性和具有爆炸性的310 气体。145化学品物理特性健康危害火险安全预防（眼镜或护目镜）。不相容的化学品其他危害氧气O2无色压缩气体熔点：-218.4℃沸点：-183℃很高浓度的氧气会刺激呼吸道。不易燃，但有助于其他物质的燃烧。加热将引起压力升高，具有爆裂危310 险。不能有明火、火花，不能抽烟；不能和易燃物接触。强氧化剂，与易燃的还原物质发生反应，导致燃烧和爆炸。与油、油脂、氢和易燃的液体、固体和气体反应。乙醇CH3CH2OH具有轻微的特有气味的无色挥发性液体熔点：-117℃沸点：79℃与水混溶。经消化道摄入消化道食入有害，。刺激眼睛。能作用于中枢神经系统。高度易燃。闪点：12℃可燃限：3～19%容器须盖紧；远离火源。与强氧化剂起剧烈的反应。乙醇胺H2NCH2CH2OH310 2-氨基乙醇具有氨味的无色、非挥发性的黏性液体。熔点：10℃沸点：171℃与水混溶。对眼睛、呼吸系统和皮肤有腐蚀性。能引起皮肤过敏。闪点：85℃使用橡胶或塑料手套和眼保护装置。与强氧化剂反应。乙腈CH3CN具有芳香味的无色液体。熔点：-46℃沸点：82℃对呼吸道、眼睛和皮肤具有刺激作用。接触后会引起惊厥、意识丧失以及氰化物中毒。高度易燃。闪点：12.8℃爆炸限：3.0～16%不能有明火、火花，不能抽烟，不能和氧化剂310 接触。只能在没有火源的情况下使用。容器应密封良好严格密封并存放在远离氧化剂的地方。在排气通风情况下使用。避免皮肤避免与与无机酸和碱反应产生有毒烟雾，。和强氧化剂作用，能侵蚀某些种类的塑料、橡胶和涂料。燃烧后降解生成氢310 氰酸和氮氧化物。146化学品物理特性健康危害火险安全预防皮肤、眼睛和黏膜接触。使用呼吸保护装置和氯丁橡胶或天然橡胶手套。不相容的化学品其他危害乙醚C2H5OC2H5带有特征性甜味的无色易挥发性液体；熔点：-116℃沸点：34℃微溶于水。对眼和呼吸道有刺激作用。能影响中枢神经系统，引起嗜睡和意识丧失；反复吸入能成瘾。310 对眼睛和呼吸道有轻微刺激作用；影响中枢神经系统、呼吸道和肾脏，是潜在的致癌物。极易燃。闪点：-45℃可燃范围：1.7～48%容器放置在良好通风的地方；远离火源；接地以防止静电；在通风橱中使用；使用丁腈橡胶手套防止皮肤脱脂。接触空气和光可形成爆炸性的过氧化物；可与氧化剂和卤素剧烈反应。乙醛CH3CHO具有刺激性水果味的无色液体或气体。熔点：-121℃沸点：21℃极易燃；蒸气/空气的混合物具有爆炸性。闪点：-39℃可燃范围：4～57%不能有明火及火花，不能抽烟，不能和热的表面接触。应储存于紧密密封严格密封的容器中，与氧化剂分开存放。只有稳定时才能贮存。在通风橱或良好的的通310 风条件下使用。使用橡胶手套、安全护目镜和呼吸保护装置。使用隔温手套，、安全护目镜和面罩来保护皮肤。不能有明火、火花，不能抽烟。使用局部排气通风系统，使用防爆的电器和照明。接触空气能产生爆炸性的过氧化物。在微量金属存在时，在酸、碱性材料的作用下聚合。是一种强还原剂，与氧化剂、多种有机物，如卤素、硫酸和胺类起剧烈的反应。乙炔HC≡CH带有微弱的醚类或大蒜气味的无色气体。加压溶解在丙酮中运输。熔点：-81℃升华点：-84℃单纯的窒息剂；皮肤接触会引起冻伤极易燃。可燃范围：2.5～310 100%强还原剂；在光的影响下，和氧化剂、氟、氯剧烈反应。和铜、银、汞或他们它们的盐反应形成震动敏感性化310 合物。147化学品乙酸CH3CO2H物理特性带有刺激性的无色液体。熔点：17℃沸点：118℃与水混溶健康危害具有腐蚀性；能引起严重烧伤；是一种具有刺激性的蒸气。反应可能会延后滞后发生。对眼睛和上呼吸道有强烈刺激性和腐蚀作用。反应可能会延后滞后发生。火险易燃。闪点：40℃可燃范围：5.4～16%安全预防不要吸入烟雾；如果眼睛接触到，立即用水冲洗并进行医学咨询；使用丁腈橡胶手套和眼保护罩。不能有明火、火花，不能抽烟；防止眼睛和皮肤接触防止与眼睛和皮肤接触。不相容的化学品遇到氧化剂发生剧烈310 或爆炸性反应。其他危害乙酸酐(CH3CO)2O带有强烈刺激性醋味的无色液体。熔点：-73℃沸点：139℃易燃。燃烧后释放刺激性的有毒烟雾或气体。闪点：49℃爆炸限：2.7～10.3%与沸水、蒸汽、强氧化剂、醇类、胺类以及强碱和其他化合物反应剧烈。有水存时能侵蚀多种金属。银Ag白色金属；接触臭氧、硫化氢或硫磺后变为黑色。熔点：962℃沸点：2212℃吸入大量金属银蒸气可引起肺损伤（肺水肿）。长期或反复接触可能引起眼、鼻、喉及皮肤出现灰兰色斑点（银中毒）。消化道摄入消化道食入和吸入都有害。对眼、呼吸系统和皮肤有刺激作用；皮肤反复接触能引起皮肤过310 敏。除粉末外，不易燃。对于粉尘和烟雾，使用局部排风或呼吸保护装置、防护手套、安全眼镜或同时具备眼和呼吸保护的装置兼具呼吸保护作用的眼保护装置。避免吸入雾滴或蒸气；避免与眼接触；使用橡胶或塑料手套以及化学级的护目镜。与乙炔、草酸、酒石酸和铵类化合物不能共存。茚三酮C9H6O4淡黄色固体；在低于241℃熔点时即分解。制成溶于丁醇的0.5%溶液，置于气溶胶喷雾罐中供使用。溶于水。可燃，易燃固体。闪点：39℃皮肤接触形成持310 久性紫斑。148149索引注：页码字体粗体表示重点讨论之处。1，1’-二苯基-4，4’-联胺1321-肼-2，4-二硝基苯1282，4，6-三硝基苯酚（苦味酸）92，1372，4-二硝基苯肼1282-氨基乙醇1463，3’-二甲基-（1，1’-联苯基）-4，4’-联铵二胺1284，4’-碳亚胺-二（N，N-二甲苯胺）136Ⅲ级生物安全柜型实验室22-23通风控制系统23BSCs见：生物安全柜GMOs见：遗传修饰生物体HEPA过滤器见：高效空气过滤器K12大肠杆菌85N-苯基-α-萘胺138N-苯基-β-萘胺138o-联甲苯胺128pUC18质粒85WHO生物安全合作中心123安全清单109-114安全仪器设备见：仪器设备，安全安全预防13，110氨水128包装系统79，80保质期，实验室/设施29爆发，未知病因疾病8爆炸性化学品92，126本生灯62苯129苯胺129苯酚129吡啶130标本61采集65容器61,65,81标记65信息有限7包装的打开61试管及采样内容物的打开65接收61标准防护方法65运输61，65310 三层包装系统79-81标记，标本65标准防护方法65-66表达系统，生物85表达载体85冰柜64冰箱64，126丙酮136丙烯醛137病毒载体85玻璃65损坏处理69，79使用注意事项62，65擦伤68擦手液，酒精类74-75，76操作规范一级和二级生物安全水平：10-11三级生物安全水平：18四级生物安全水平：22草酸131超净工作台45超声波清洗仪125超声处理器55，64，125超速离心机125抽烟10，26储存装有感染性物质的安瓿74化学品108压缩气体和液化气93，111设施，检查表109150医药技术社区WWW.MSP123.CN310 致力于医药技术第一社区http://www.pharmst.cn医&药社区关注医药发展医药做医药人自己的网站易燃液体111空间，实验室12传染性海绵状脑病（TSEs）66窗户动物设施26,27无脊椎动物设施28实验室11，13，18次氯酸钙72次氯酸钠（漂白剂）72-73，75，139醋酸亚铊131地板12，18碘75，131碘伏75电的危害17，92，126安全清单111电力供应13，23垫料，动物26，27叠氮化钠132叠氮化物92，142动物动物尸体的处理26非实验用动物25转基因和基因“敲除”86动物设施25-28一级生物安全水平：26二级生物安全水平：26三级生物安全水平：27四级生物安全水平：27-28防护水平25无脊椎动物28动物设施生物安全水平（ABSL）25冻干的感染性物质，打开安瓿64冻干机125断路器95对二氨基联苯132多聚甲醛74，76儿童9二噁烷132二级生物安全水平：1，3，9-17动物设施26实验室设计11-13，14实验室安全检查表36-37健康和医学监测15参见：基础实验室二甲胺133二甲苯133二氯异氰尿酸钠（NaDCC）73二氧化氯73，134二氧化碳，固体（干冰）310 134二乙烯化二氧132二乙烯化氧141防毒面具（呼吸防护装备）18，56-57防腐剂71，74，75防护，基础四级生物安全水平22-23防护服22参见：防护服型实验室防护服型实验室22通风控制系统23防护实验室（三级生物安全水平）1，3，18-20操作规范18设计和设施18-19，20设备19健康和医学监测19，21安全检查表38防护水平，动物设施25参见：生物安全水平防止逆流13，19放射性废弃物97放射性核素生物安全柜57安全操作实践96-97替代96废弃物16-17动物设施26,27,28四级生物安全水平：23清除污染16，19丢弃16，19，78无脊椎动物设施28朊病毒污染的67放射性的97沸腾76酚类化合物74焚烧17，78焚烧炉27，78服装，防护22福尔马林73，75辐射，电离17，95-97损害作用95防护原则95-96安全清单114实验区域97辐射区域96辐射危险标志96负压柔性薄膜隔离装置53，54盖玻片，显微镜用65干燥器125310 感染性微生物，危险度等级见：危险度等级，151微生物学感染性物质高压灭菌和重复使用16避免散布62接触皮肤和眼睛62清除污染见：清除污染丢弃16，19食入62，68清单113溢出物11，69，80-81感染性物质的食入62，68感染性物质散布，避免62高氯酸92，134高锰酸钾134高酸类75高效空气（HEPA）过滤器动物设施26生物安全柜46，49三级生物安全水平：19四级生物安全水平：23朊病毒污染67高压灭菌16，76-78高压灭菌器54，76-78动物设施27配备13，15，19，23双门传递型22，23燃料加热压力锅77重力置换77装载77预真空77使用注意事项77-78验收15隔离笼具26，27隔离衣56隔离装置，负压柔性薄膜53，54个人防护装备/服装55-57动物设施27基础实验室9-10生物安全柜52清单112防护实验室18-19最高防护实验室22，23朊病毒67铬酸134工程保养103工作表面动物设施26实验室11，12工作区域，实验室11工作人员见：人员供气系统30生物安全柜45-50防护服22参见：通风系统供水系统13，19汞135关于危险性货物运输的联合国专家委员会（UNCETDG）79国际空运协会（IATA）79国际民用航空组织（ICAO）79国际运输规定79过敏，乳胶57过氧化物75，147含乙醇的擦手液75，76后勤保障人员310 103护目镜56化学品（危害性）17，91-93生物安全柜49爆炸性92，126不相容性，一般原则91暴露途径91安全清单114特殊的127-149溢出物92储存91毒性作用91-92化学杀菌剂71，72-75化妆品10环见：移动环环境卫生设施109缓冲间18，29，37火焰，明火51，62火焰光度计126火灾19，94原因94，126应急程序69防护检查表111基本防护22-23基础实验室（一级和二级生物安全水平）1，9-17化学品、火、电、辐射和仪器安全17操作规范9-11设计和设施11-13设备13-15健康和医学监测15安全检查表32-37培训15废弃物处理16-17基因敲除动物86基因转移310 85，86152急救13，121急救盒121急救装备70脊髓灰质炎病毒敏感性小鼠86季铵化合物74家具，实验室12甲苯135甲醇136甲醛73，75，136检查31检查，实验室31检查，实验室安全31表格32-38建筑物维护与保养103健康和医学监测基础实验室15清单122防护实验室19，21搅拌器55，64接种，意外63节肢动物12虫害的控制11，25饲养设施28金胺136紧急救助69-70紧急事件68-70四级生物安全水平：22，24意外事故应对方案68实验室操作68-70进入动物设施26,27实验室9-10，18，24警报器19，52抗菌剂71克雅病（CJD）66空气，排放见：排风空气过滤器见：高效微粒空气（HEPA）过滤器苦味酸/苦味酸盐92，137昆虫，飞行28冷冻干燥机125冷却设施，节肢动物28离心机65-66，125离心管破裂69防护配件19不当使用126连体服55-56脸部防护10，55-56淋浴22，27磷酸137灵长目，非人类26流出物，污染11，23硫化氢148硫酸137六价铬氧化物134笼具动物26，27飞虫28漏电保护器95氯72-73，138氯胺72，73氯仿140310 氯化氢145螺口盖瓶子14，54门动物设施25实验室12，18，23醚类147免疫，工作人员122面罩（面具）10，56灭火器94灭菌23，71-78预先清洁71，72定义71热76-78朊病毒污染的物质67参见：清除污染；消毒灭菌剂71萘胺138啮齿动物控制11，26暖气、通风和空调（HVAC）系统清单110排风动物设施26生物安全柜19，22，45-49防护实验室18，19最高防护实验室23排水沟，防护23排泄物，标准防护方法65-66培训104-105动物设施工作人员27，28生物安全柜的使用52生物安全保障41实验室工作人员15培养搅拌器、振荡器、搅拌器125喷溅罩53310 皮肤19153接触62刺伤，切割和磨擦68参见：损伤蜱28漂白剂（次氯酸钠）72-73，75，139平光眼镜，安全56瓶子，螺口盖14，54气流，定向的2，19警报器19，52动物设施26,27生物安全柜45，49三级生物安全水平：22四级生物安全水平：22-23气溶胶2产生气溶胶的操作45生物安全柜和14，45移液操作危害54潜在感染性气溶胶的释放69安全设备和53气锁23气体压缩和液化93，111-112供实验室用13墙壁12，18切割伤68氢氧化钾139氢氧化钠139清除程序，溢出81清除手部污染76清除污染生物安全柜52，76血液/体液65定义71流出物11，23手76局部环境75-76朊病毒污染材料67废弃材料17，19参见：清洁；消毒清单，安全109-114清洁生物安全柜52内务103实验室材料71-72电冰箱和冰柜64氰化钠139全排风式安全柜49热消毒和灭菌76-78干76湿76人员生物安全管理11生物安全保障问题41设施，安全清单109-110健康和医学监测见：健康和医学监测免疫122个人物品/服装12对自身安全的责任101支持103培训见：培训认证生物安全柜51-52实验室/设施31容器破碎69污染废弃物17防漏54丢弃锐器310 16，54标本61，65，79乳胶过敏症57朊病毒66-67锐器16动物设施26避免损伤57，63，65用于盛放锐器的一次性容器16，54三层包装系统79，80三级生物安全水平：1，3，18-20动物设施27实验室设计18-19实验室安全检查表38参见：防护实验室三氯生74三氯乙酸140三氯乙烯141杀孢子剂71杀菌剂，化学71，72-75纱窗，预防节肢动物28设计，实验室一级和二级生物安全水平：11-13三级生物安全水平：18-19，20四级生物安全水平：22-24试运行要求和29设施，实验室一级和二级生物安全水平：11-13三级生物安全水平：18-19，20四级生物安全水平：22-24生物安全水平名称1310 生物安全154管理11对应于实验室生物安全保障41生物安全保障41-42生物安全官员15，101生物安全柜（BSCs）45-52，53通风连接49动物设施26认证51Ⅰ级46，49Ⅱ级46-48，49A1型47A2、B1和B2型48Ⅲ级49实验室22-24清除污染52，76排风见：排风位置19，50操作和维护51朊病毒污染67必需使用14，18，19安全使用50-52，62选择45，49生物安全委员会101-102生物表达系统85生物杀灭剂71生物危害警告标志9，10，18，26释放氯的化合物72实验对象保护45，46实验室生物安全水平见：生物安全水平生物安全保障41-42认证31试运行29-30设施见：设施，实验室建筑，安全清单109安全检查表32-38保养，安全清单110技术61-67工作区域11参见：基础实验室；防护实验室；最高防护实验室实验室主管11，101培训作用15，104实验室主任11，101实验台12食10，12，26，62食物10世界卫生组织（WHO）生物安全合作中心123生物安全规划22事故10设备相关的126参见：急救；损伤；溢出事件310 见：事故；溢出物试管在离心机中破损69螺口盖14试运行，实验室/设施29-30试运行机构29手套9，52，56，57双人工作制度22，27水浴器125水平和垂直气流的安全柜45四级生物安全水平：1，3，22-24动物设施28-29实验室设计22-24参见：最高防护实验室四亚甲基化氧141四氯化碳141四氢呋喃141四氧化锇141-142苏打灰（碳酸钠）92损伤动物设施工作人员26应急程序68预防62-63碳酸氢铵75碳酸氢钠92体液，标准防护方法65-66天花板12，18听力保护95通风系统动物设施25,27基础实验室14检查表126防护实验室21最高防护实验室23通讯设施22通用防护措施65-66铜142涂片，显微镜观察65外套，实验室55，56危险度等级，微生物学基础实验室9生物安全水平和2-3分类1-2危险度评估，微生物学2，7-8动物设施25遗传修饰生物体86-87微生物学技术规范（GMT）310 9-11，61-67155微生物学危险度评估见：危险度评估，微生物学微型加热器53，55围裙55，56维护人员103污染材料见：感染性物质污染的液体/流出物11，23无脊椎动物28五氧化二磷142戊二醛84，142-143硒143洗手10，57，76动物设施工作人员26设施12，18，26细胞松弛素143显微镜，盖玻片和涂片65消毒71-78生物安全柜52化学72-75预清洁71定义71热76-78溢出物81废弃材料17参见：清除污染；灭菌消毒剂71，72-75硝基苯143硝酸144硝酸银144小虫28鞋类10，18，22，56鞋子见：鞋类休息设施12溴144溴化氰145血，标准防护方法65-66血清，分离63熏蒸消毒75亚碲酸钾145亚硒酸氢钠145盐酸145眼睛防护10，55-56，62厌氧罐/培养箱125，126验收，仪器设备15氧146摇床55，64一级生物安全水平：1，3，9-17动物设施26实验室设计11-13实验室安全检查表32-35健康和医学监测15参见：基础实验室一级生物安全水平动物设施（ABSL）25设施要求3微生物学危险度等级和1-3医疗联系卡19，21医学监测见：健康和医学监测仪器设备基础实验室13-15防护实验室19急救70危害131-126个人防护见：个人防护装备/服装安全17，53-57清单113移动环一次性14，55，53微型加热器55，53安全使用62移液61辅助器310 14，53，54，61嘴10，54移液管15，61遗传工程85遗传修饰生物体（GMOs）85-87进一步的考虑87危险度评估86-87类型85-86乙醇75乙醇（酒精）74-75，146乙醇胺146乙腈137乙醚147乙醛136乙炔137乙酸136乙酸酐136异丙醇（2-丙醇）74，128异丙醇（异丙基醇）74，128易燃液体的储存111意外事故应对方案68溢出物在生物安全柜内51血66化学92感染性物质10，62，79-81银148饮水10，12，26隐形眼镜310 10156茚三酮148育龄妇女15，113预清洁71，72匀浆器55，64，125运输11，79-81感染性废弃物17，19国际规定79标本61，65三层包装系统79，80灾害，自然68，69载体85噪声95照明12，13，110针，皮下的10，65，124丢弃16针刺损伤，避免62-63真空管道19，54真空烧瓶126植物，转基因85，86重组DNA技术85-87注射器10，16转基因动物86转基因植物85，86装有感染性物质的安瓿开启64储存65着装，防护见：个人防护装备/服装紫外灯51自然灾害68，69组织包含朊病毒66-67标准防护方法66组织研磨器64，125最高防护实验室（四级生物安全水平）1，3，22-24操作规范22设计和设施310 22-24157百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网92to.com,您的在线图书馆310