第章 食品微生物检测的其他常见项目

第八章食品微生物检测的其他常见项目第一节金黄色葡萄球菌及其检验一、生物学特性（一）形态与染色：革兰氏阳性球型菌，排列呈葡萄状。无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um.,普通0.4~1.2um。（二）葡萄球菌的分类金黄色葡萄球菌表面葡萄球菌腐生葡萄球菌（三）金黄色葡萄球菌培养特性1、需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、PH7.42、对营养要求不高，在普通培养基中生长良好，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。3、耐盐性强，在含7.5~15%培养基中能生长。4、在肉汤中是混浊生长，时间过长，有少量沉淀。5、在普通培养基上生长，可形成圆形，凸起，表面光滑，边缘整齐，不透明，直径1～2mm的菌落能产生黄色色素。（四）金黄色葡萄球菌生化特性1、可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。2、甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。3、许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。4、金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。（五）金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶1、溶血毒素2、杀白细胞素3、血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。4、脱氧核糖核酸酶：5、肠毒素6、溶纤维蛋白酶7、透明质酸酶二、金黄色葡萄球菌的致病性金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。附：金黄色葡萄球菌引起的下颚感染金黄色葡萄球菌引起的须疮感染葡萄球菌感染创口的革兰氏染色涂片葡萄球菌创口感染革兰氏染色涂片（一）金黄色葡萄球菌的流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。　　近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。流行病学一般有如下特点季节分布，多见于春夏季； 中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。　　一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染金黄色葡萄球菌肠毒素金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件：　　存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；　　存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；　　食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。（二）食物中毒的临床症状由肠毒素引起毒素进入人体后，潜伏期1-5小时,最短15分钟,有发病快、消失快的特点症状：先唾液分泌亢进，恶心、反复呕吐、腹痛、水样腹泻等金黄色葡萄球菌污染的控制*防止金黄色葡萄球菌污染食品　　防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。　防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。*防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。三、金黄色葡萄球菌的检验方法：增菌培养法、直接计算法（一）增菌培养法的检验步骤（程序）（二）检验操作要点p2241、增菌：7.5%Nacl肉汤，37℃24h，呈均匀浑浊生长。2、平板分离：血平板,37℃24~48h菌落成金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有透明溶血圈（β型）B—P平板：主要成分及作用：　氯化锂、甘氨酸:抑制非制病性葡萄球的生长丙酮酸钠:促进葡萄球菌生长亚碲酸钾:抑制G-杆菌生长，可被金黄色葡萄球菌还原为碲盐呈黑色卵黄:含蛋白质、卵磷脂、脂肪在B-P平板上的菌落特征:为圆形，光滑凸起、湿润、Ф2-3mm ，呈灰色至黑色，边缘色淡周围为浑浊带，在其外层有一透明带。3：镜检与血浆凝固E试验*从B-P平板上挑取金黄色葡萄球菌的菌落进行镜检*如发现葡萄球菌,再做血浆凝固E试验*做血浆凝固E试验金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验p2244：结果报告方式（1）初步报告：根据血平板培养计数和镜检，如发现有G+葡萄串状球菌存在，且有溶血性，则初步报告为：“有金黄色葡萄球菌存在，1g样品约含多少。”（2）结果报告：根据培养特性、镜检、生化试验、动物试验结果，可报告为：“是否是致病性葡萄球菌”.思考题1、金黄色葡萄球菌可产生哪些毒素和酶？2、金黄色葡萄球菌在B-P平板上的菌落特征如何，说明其原理。3、金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何，说明其原理。4、确认葡萄球菌为金黄色葡萄球菌的依据至少应包括哪几个试验？5、金黄色葡萄球菌的形态与染色、培养特征如何？第二节食品中溶血性链球菌的检验p225一、概述沙志金链菌二、生物学特性（一）形态与染色：1呈球形或卵圆形，直径0.5μm-1μm链状排列（长短不一）2革兰氏染色阳性，衰老培养物常成阴性3无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜（二）培养特性1、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧2、对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加血清液、腹水等）3、最适温度37℃PH7.4~7.64、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链菌。5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、有乳光圆形突起的细小菌落，直径0.5～0.75mm，针尖大小，菌落周围出现溶血环。链激酶：αβγα四种溶血。(三)生化特性1、均分解葡萄糖产酸2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。3、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶、不分解葡糖（肺炎球菌分解葡萄糖）4、A群菌对杆菌肽敏感p227(6)，4（4）②（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶1、溶血素2、致热外毒素3、透明质酸酶4、链激酶5、链道酶6、杀白细胞素 （五）抵抗力60℃30min即被杀死，对常用消毒剂敏感乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。（六）链球菌分类p2251、按溶血能力分类（按照在血平板上溶血情况分为）：（1）甲型（α）溶血性链球菌（2）乙型（β）溶血性链球菌——与人类疾病有关（血清型90%属于A族链球菌）（3）丙型（γ）链球菌2、按血清学分类主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。组抗原：用英文字母区分，共分18群：ABCDEFGHKLMNOPQRST型抗原：用阿拉伯数字表示，对人类致病的90%在A群中。(七)流行病学与致病性*溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品：　　1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染；　　2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；　　3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。三、微生物检验（一）检验程序液体检样*固体检样→样品处理→增菌培养→分离培养→纯化培养→生化鉴定→报告（二）检验操作要点p2261、采样：食品：按常规人体：咽拭、血、尿2、增菌培养：葡萄糖肉浸液肉汤一般情况36±1℃24h匹克氏肉汤：在污染严重时用3、分离培养：血平板，37℃24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环4、分纯培养：血平板37℃24h5、镜检：革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生化鉴定。6、生化鉴定：p227（1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验）吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。（2）杆菌肽敏感试验 将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板，在划线处贴附杆菌肽纸片，37℃18h，出现抑菌带为阳性，（可推测为乙型溶血性链球菌）7、报告：*根据培养后的形态，菌落特征及生化试验可报告：*有乙型溶血性链球菌生长。思考题：1、链球菌的溶血现象有哪几个类型，各类型的溶血特征如何。2、溶血性链球菌在血平板和葡萄糖肉汤中生长有何特征？3、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？4、写出链球菌的检验程序，并说明链激酶的反应原理。 运动与健康题目：体育锻炼对运动系统的影响指导老师：欧阳靜仁班级：热能092班姓名：林灿雄学号：200910814223 摘要：这篇文章通过对人体运动系统组成的介绍，以及体育锻炼对运动系统的作用和影响的一点点描述，给平时不重视锻炼的人说明了体育锻炼的好处，希望能够有更多的人重视体育锻炼。本文部分地方参考相关文件，可信度在一定程度上得到提高，同时也未免有疏落之处，请指正。参考：http://baike.baidu.com/view/63163.htmhttp://wenku.baidu.com/view/5df244d728ea81c758f5787c.html 关键词：骨，骨连接，骨骼肌，支架作用、保护作用和运动作用，合理的体育锻炼，三磷酸腺苷（ATP）酶 前言体育锻炼与我们息息相关，在我们的身边，无时无刻都有人在运动，各种球类运动、跑步、游泳等等...大家都知道体育锻炼对人体是有好处的，然而具体有些什么好处呢？这个答案有多少人知道。通过这篇文章，希望可以增加大家对体育锻炼的认识。体育锻炼既可增强关节的稳固性，又可提高关节的灵活性。体育锻炼可使肌纤维变粗，肌肉体积增大，因而肌肉显得发达、结实、健壮、匀称而有力。体育锻炼有助于增强肌肉的耐力。体育锻炼能保持肌肉张力，减小肌萎缩和肌肉退行性变化，保持韧带的弹性和关节的灵活性，使脊柱的外形保持正常，从而能够减少和防止骨骼、肌肉、韧带、关节等器官的损伤和退化。 一、人体运动系统的组成人体运动系统的组成包括骨、骨连接和骨骼肌。骨以不同形式（不动、微动或可动）的骨连接联合在一起，构成骨骼，形成了人体体形的基础，并为肌肉提供了广阔的附着点。肌肉是运动系统的主动动力装置，在神经支配下，肌肉收缩，牵拉其所附着的骨，以可动的骨连接为枢纽，产生杠杆运动。（一）骨的组成部分：骨bone是以骨组织为主体构成的器官，是在结缔组织或软骨基础上经过较长时间的发育过程（骨化）形成的。成人骨共206块，依其存在部位可分为颅骨、躯干骨和四肢骨。各部分骨的名称、数目见下页表。骨的形状：人体的骨由于存在部位和功能不同，形态也各异。按其形态特点可概括为下列四种：1、长骨　　longbone主要存在于四肢，呈长管状。可分为一体两端。体又叫骨干，其外周部骨质致密，中央为容纳骨髓的骨髓腔。两端较膨大，称为骺。骺的表面有关节软骨附着，形成关节面，与相邻骨的关节面构成运动灵活的关节，以完成较大范围的运动。2、短骨　　shortbone 　　为形状各异的短柱状或立方形骨块，多成群分布于手腕、足的后半部和脊柱等处。短骨能承受较大的压力，常具有多个关节面与相邻的骨形成微动关节，并常辅以坚韧的韧带，构成适于支撑的弹性结构。3、扁骨　　flatbone呈板状，主要构成颅腔和胸腔的壁，以保护内部的脏器，扁骨还为肌肉附着提供宽阔的骨面，如肢带骨的肩胛骨和髋骨。4、不规则骨irregularbone　　形状不规则且功能多样，有些骨内还生有含气的腔洞，叫做含气骨，如构成鼻旁窦的上颌骨和蝶骨等。（二）骨连接1、韧带连接两骨之间靠结缔组织直接连结的叫韧带连接。韧带ligament多呈膜状、扁带状或束状，由致密结缔组织构成。肉眼观呈白色，有光泽，附着于骨的地方与骨膜编织在一起，很难剥除，有的韧带由弹性结缔组织构成，肉眼观呈淡黄色，叫做黄韧带（如项韧带）。一般的韧带连接允许两骨间有极微的动度。但有些骨与骨之间，两直线缘相对或互以齿状缘相嵌，中间有少量结缔组织纤维穿入两侧的骨质中，使连结极为紧密，叫做缝，如颅骨的冠状缝和人字缝。2、软骨结合 相邻两骨之间以软骨相连接叫软骨结合。软骨组织属结缔组织的一种，呈固态有弹性，由大量的软骨细胞和间质构成，由于间质的成分不同，又有透明软骨、纤维软骨和弹力软骨的区分。第一助骨连于胸骨的软骨属透明软骨，而相邻椎骨椎体之间的椎间盘则由纤维软骨构成。由于软骨具有一定弹性，所以能做轻微的活动。有的软骨结合保持终生，而大部分软骨结合在发育过程中骨化变为骨结合。2、骨结合由软骨结合经骨化演变而成，完全不能活动，如五块骶椎以骨结合融为一块骶骨。（三）骨骼肌骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种。肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多岩细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（I带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个z线之间的区段，叫做一个肌节，长约1.5~2.5微米。相邻的各肌原纤维，明带均在一个平面上，暗带也在一个平面上，因而使肌纤维显出明暗相间的横纹。骨骼肌细胞构成骨骼肌组织，每块骨骼肌主要由骨骼肌组织构成，外包结缔组织膜、内有神经血管分布。骨骼肌收缩受意识支配，故又称“随意肌”。收缩的特点是快而有力，但不持久。 运动系统的肌肉属于横纹肌，由于绝大部分附着于骨，故又名骨骼肌。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉具有一定的弹性，被拉长后，当拉力接触时可自动恢复到原来的程度。肌肉的弹性可以减缓外力对人体的冲击。肌肉内还有感受本身体位和状态的感受器，不断将冲动传向中枢，反射性地保持肌肉的紧张度，以维持体姿和保障运动时的协调。二、体育锻炼对运动系统的作用运动系统主要起支架作用、保护作用和运动作用。人体的运动系统是否强壮、坚实、完善，对人的体质强弱有重大影响。例如，骨架和肌肉对人体起着支撑和保护作用。它不仅为内脏器官，如心、肺、肝、肾以及脑、脊髓等的健全、生长发育提供了可能，而且能保护这些器官使之不易受到外界的损伤。骨、软骨、关节、骨骼肌是人体运动器官，骨的质量，关节连接的牢固性、灵活性，肌肉收缩力量的大小和持续时间的长短等，在很大程度上决定了人体的运动能力。合理的体育锻炼能促进骨的血液循环，增加对骨的血液供应，使正处旺盛造骨时期的骨组织能获得更多造骨原料，加速造骨过程，加快骨的生长。增强骨的抗折抗弯抗压扭曲等能力，使骨更坚固。还能预防关节的变形，保持骨的弹性，延缓骨的老年性退行性变化。除此之外，体育锻炼还有助于增强韧带的弹性，增加关节的稳固性，提高关节的灵活性。 通过体育锻炼，可以使肌肉体积增大，肌肉中脂肪含量减少，肌肉内结缔组织增多，肌肉内化学成分发生变化，肌肉毛细血管增多。体育锻炼时，由于肌肉的活动，促使肌肉内毛细血管大量开放，这样肌肉可获得比平时多得多的氧气及养料，大力促进肌肉的生长，使差价活动的肌纤维数量增加。二、体育锻炼对运动系统的影响体育锻炼既可增强关节的稳固性，又可提高关节的灵活性。关节稳固性的加大，主要是增强了关节周围肌肉力量的结果，同时与关节和韧带的增厚也有密切的关系。关节灵活性的提高，主要是关节囊韧带和关节周围肌肉伸展性加大的结果。人体的柔韧性提高了，肌肉活动的协调性加强了，就有助于适应各种复杂劳动动作的要求。体育锻炼可使肌纤维变粗，肌肉体积增大，因而肌肉显得发达、结实、健壮、匀称而有力。正常人的肌肉约占体重的35％－40％，而经常从事体力劳动和体育锻炼的人，肌肉可占体重的45％－55％。体育锻炼可使肌肉组织的化学成分发生变化，如肌肉中的肌糖原、肌球蛋白、肌动蛋白和肌红蛋白等含量都有所增加。肌球蛋白、肌动蛋白是肌肉收缩的基本物质，这些物质增多不仅能提高肌肉收缩的能力，而且还使三磷酸腺苷（ATP）酶的活性增强，供给肌肉的能量增多。肌红蛋白具有与氧结合的作用，肌红蛋白含量增加，则肌肉内的氧储备量也增加，有利于肌肉在氧供应不足的情况下继续工作。体育锻炼有助于增强肌肉的耐力。 因为体育锻炼可使肌纤维内线粒体的大小和数量成倍增加，同时在锻炼时还使肌肉中的毛细血管大量开放（安静时肌肉每平方毫米内开放的毛细血管不过80条左右，剧烈运动时开放数可增加到2000－3000条）从而产生更多的能量。因此，长期坚持锻炼，可使肌肉的毛细血管形态结构发生变化，出现囊泡状，增加肌肉的血液供应量。体育锻炼能保持肌肉张力，减小肌萎缩和肌肉退行性变化，保持韧带的弹性和关节的灵活性，使脊柱的外形保持正常，从而能够减少和防止骨骼、肌肉、韧带、关节等器官的损伤和退化。讨论：太极拳对运动系统的作用。总的来说，太极拳是技击与健身相结合的古老拳术。要求心境意导，呼吸自然，思想专一，心理安静，意念引导动作，呼吸要求自然平稳，并与动作相配合。中正安舒，松柔连贯；圆括自然，周身协调；刚柔相济。太极拳运动是一种有氧运动，是神经系统与运动系统，心血管系统，呼吸系统充分协调的全身运动。太极拳运动是一种神经系统协调下的全身运动，在运动中使全身各种细胞，器官同时平均发展为原则。练太极拳可以“蠕筋骨，利关节”，有抗老防衰之功效。俗话说，人老腿先老。而太极拳重视下肢运动，练太极拳腿部肌肉发达，血管丰满，这样就增加了血液输送与回流的泵力。另外，虚实转换能锻炼两腿的耐力，对维持人体的平衡大有好处。即使运动时全身之肌肉虽已成疲劳不堪的状态，而心脏的搏动并不失常，呼吸并不困难，相反的在运动后，尚能感到比运动前呼吸轻松舒畅。太极拳运动要求松靜与运动相结合，松靜反应主要表现为副交感神经兴奋，使心跳平稳，呼吸匀长，微血管扩张，腺体分泌增加。而且练太极拳对许多慢性而服药不易见效的疾病会产生显著疗效。 综上所述，我们应该重视体育锻炼，只有积极参加体育锻炼，才能拥有强健的体魄以及良好的心态，才能更好的进行学习及工作，完成我们的理想。